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國中教甄|生物生物103 年第 14 題單選題

在核酸聚合酶連鎖反應中(Polymerase chain reaction 簡稱 PCR),使用之反應條件如下,下列溫度配對何者正確? 第一階段(1 cycle):94℃(2 min) 第二階段(30 cycle):94℃(30sec),60℃(30sec),72℃(2 min) 第三階段(1 cycle):72℃(10 min)

AAnnealing: 94℃;Denaturation: 60℃;Extension: 72℃
BAnnealing: 60℃;Denaturation: 94℃;Extension: 72℃正確答案
CAnnealing: 60℃;Denaturation: 60℃;Extension: 94℃
DAnnealing: 72℃;Denaturation: 94℃;Extension: 60℃
答案與詳解
B
正確答案
PCR反應中,94℃用於DNA變性解鏈,60℃用於引子黏合,72℃為聚合酶延伸合成的最適溫度。

逐選項解析

AAnnealing: 94℃;Denaturation: 60℃;Extension: 72℃✕ 錯誤
94℃是使DNA變性解鏈的高溫,並非引子黏合溫度;60℃為黏合溫度,而非變性溫度。
BAnnealing: 60℃;Denaturation: 94℃;Extension: 72℃✓ 正確
60℃為引子與模板黏合(Annealing)的溫度,94℃為雙股DNA變性(Denaturation)的溫度,72℃為Taq DNA聚合酶進行延伸(Extension)的最適溫度,配對完全正確。
CAnnealing: 60℃;Denaturation: 60℃;Extension: 94℃✕ 錯誤
DAnnealing: 72℃;Denaturation: 94℃;Extension: 60℃✕ 錯誤

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