下列何者為差異性萃取法（differential extraction）最關鍵的試劑？其作用為何？
ASDS；使蛋白質變性
BEDTA；螯合鎂離子
CProteinase K；分解蛋白質
DDTT；還原二硫鍵正確答案
答案與詳解
D
正確答案
差異性萃取法利用DTT還原精子細胞膜的二硫鍵，從而分離混雜斑中的男女DNA。
為什麼答案是 D
DTT為強還原劑，能特異性破壞精子細胞膜及核蛋白的二硫鍵，是分離男性DNA的最關鍵試劑。
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完整詳解
Pro · 無限重點 差異性萃取法利用DTT還原精子細胞膜的二硫鍵，從而分離混雜斑中的男女DNA。
秒殺技巧
差異性萃取法核心在『精子抗常規裂解』，需靠DTT還原二硫鍵才能破解精子細胞膜。逐選項分析
A✕ 陷阱
SDS為常規細胞裂解試劑，無法單獨區分上皮細胞與精子，非差異性萃取最關鍵試劑。
B✕
EDTA主要用於螯合金屬離子以抑制DNase活性或抗凝血，與差異性分離男女DNA無關。
C✕ 陷阱
Proteinase K可分解蛋白質，但精子細胞因富含二硫鍵而對其具抗性，無法單獨裂解精子。
D✓ 正確
DTT為強還原劑，能特異性破壞精子細胞膜及核蛋白的二硫鍵，是分離男性DNA的最關鍵試劑。
差異性萃取法(Differential Extraction)步驟與試劑
| 步驟 | 目標細胞 | 關鍵試劑 | 作用機制 |
|---|---|---|---|
| 第一步驟 | 女性陰道上皮細胞 | SDS + Proteinase K | 裂解上皮細胞，釋放女性DNA；精子因二硫鍵保護而完整 |
| 離心分離 | 分離男女細胞 | 離心機 | 上清液含女性DNA，沉澱物為完整精子 |
| 第二步驟 | 男性精子細胞 | DTT + SDS + Proteinase K | DTT還原二硫鍵破解精子，釋放男性DNA |
陷阱提醒
考生易誤選SDS或Proteinase K，因其在常規萃取中最常見。但差異性萃取的『差異』核心在於精子對常規試劑有抗性，必須靠DTT破壞二硫鍵才能裂解精子，切勿混淆常規與差異萃取的關鍵試劑。