高考-法醫師法醫生物學112 年第 13 題單選題
下列何種核酸組成溶液於260 nm測得吸光值為1.0時,其濃度最高?
Agenomic DNA正確答案
BmRNA(約1000 base)
CDNA primer
DdNTP
A正確答案
A260=1.0 時,分子越長、結構越雙股,單位體積吸光貢獻越低,故同樣吸光值下濃度(μg/mL)需越高才能達到;雙股 genomic DNA 最高。
為什麼答案是 A
genomic DNA 為雙股結構,鹼基堆疊產生 hypochromic effect(減色效應),吸光能力較低。A260=1.0 時濃度約 50 μg/mL,為四者最高。
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完整詳解
Pro · 無限重點 A260=1.0 時,分子越長、結構越雙股,單位體積吸光貢獻越低,故同樣吸光值下濃度(μg/mL)需越高才能達到;雙股 genomic DNA 最高。
記憶口訣:A260=1.0 → dsDNA 約 50 μg/mL > ssRNA 約 40 > ssDNA oligo 約 33 > 單核苷酸更低。雙股最不吃光,濃度最高。
逐選項分析
A✓ 正確
genomic DNA 為雙股結構,鹼基堆疊產生 hypochromic effect(減色效應),吸光能力較低。A260=1.0 時濃度約 50 μg/mL,為四者最高。
B✕ 陷阱
mRNA 為單股 RNA,鹼基堆疊較弱,A260=1.0 約對應 40 μg/mL,次於雙股 DNA。長鏈 RNA 雖有部分二級結構但整體仍比 dsDNA 吸光高、濃度低。
C✕
DNA primer 為短單股寡核苷酸(約 20 mer),無雙股堆疊保護,吸光效率高。A260=1.0 約對應 33 μg/mL,濃度低於 dsDNA 與 mRNA。
D✕
dNTP 為游離單核苷酸,無任何鹼基堆疊,莫耳吸光係數最高(每個鹼基都完全暴露),A260=1.0 對應的質量濃度最低。
A260 = 1.0 對應核酸濃度換算
| 核酸類型 | 結構 | 濃度 (μg/mL) | 吸光特性 |
|---|
| dsDNA (genomic) | 雙股 | 約 50 | 減色效應最強 |
| ssRNA (mRNA) | 單股含二級結構 | 約 40 | 部分堆疊 |
| ssDNA oligo (primer) | 單股短鏈 | 約 33 | 幾乎無堆疊 |
| dNTP | 游離單核苷酸 | 約 20-33 | 完全暴露,吸光最強 |
考生容易以為「分子越大越吸光」而選 genomic DNA,這個直覺剛好答對,但真正原因是雙股結構的減色效應,不是分子量大。若題目換成 ssDNA vs dsDNA 同長度,仍是 dsDNA 濃度高。