高考-法醫師法醫生物學112 年第 10 題單選題考點：TaqMan原理考點：名詞偷換
以TaqMan probe的方式進行即時定量PCR，對螢光訊號產生最有貢獻之反應為：
ATaq DNA polymerase具備5' exonuclease活性而釋放reporter dye正確答案
BTaq DNA polymerase具備5' exonuclease活性而釋放quencher dye
CTaq DNA polymerase具備3' exonuclease活性而釋放reporter dye
DTaq DNA polymerase具備3' exonuclease活性而釋放quencher dye
A正確答案
TaqMan探針靠Taq聚合酶的5'→3'外切酶活性，切掉reporter dye使其脫離quencher抑制而發光。
逐選項解析
ATaq DNA polymerase具備5' exonuclease活性而釋放reporter dyeTaqMan原理✓ 正確
Taq DNA polymerase 具 5'→3' exonuclease 活性，在延伸時切斷 TaqMan probe 5' 端的 reporter dye，使其脫離 quencher 的 FRET 抑制而發出螢光，是訊號主要來源。
BTaq DNA polymerase具備5' exonuclease活性而釋放quencher dye名詞偷換✕ 易錯陷阱
方向正確但角色顛倒。被釋放而發光的是 reporter dye（位於5'端），quencher（位於3'端）是抑制者。釋放 quencher 並非訊號產生的主要機制。
CTaq DNA polymerase具備3' exonuclease活性而釋放reporter dye✕ 易錯陷阱
DTaq DNA polymerase具備3' exonuclease活性而釋放quencher dye✕ 錯誤
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