高考-法醫師法醫生物學105 年第 39 題單選題
下列何者不是以 real-time PCR 定量 DNA 的優點？
A專一性高
B可即時偵測 PCR 複製之過程
C較其他定量 DNA 之方法靈敏
D價格便宜，不需要特殊的設備，一般的 PCR 機器即可進行正確答案
D正確答案
real-time PCR 需特殊螢光偵測儀器，價格昂貴，並非一般 PCR 機可執行。
為什麼答案是 D
real-time PCR 需搭配具螢光偵測系統之專用熱循環儀 (如 ABI 7500)，設備昂貴，一般 PCR 機無法執行，此為缺點而非優點。
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完整詳解
Pro · 無限重點 real-time PCR 需特殊螢光偵測儀器，價格昂貴，並非一般 PCR 機可執行。
看到「便宜」「一般設備」幾乎都是陷阱選項，real-time PCR 以精密著稱。
逐選項分析
A✕
real-time PCR 使用專一性探針 (如 TaqMan) 或引子，對目標序列辨識能力高，是其公認優點。
B✕
「real-time」的核心特色即是透過螢光訊號即時監測每一循環的 DNA 擴增量，而非終點才讀取。
C✕
相較傳統定量法 (如電泳密度比對)，real-time PCR 可偵測極低量 DNA (pg 級)，靈敏度極高。
D✓ 正確
real-time PCR 需搭配具螢光偵測系統之專用熱循環儀 (如 ABI 7500)，設備昂貴，一般 PCR 機無法執行，此為缺點而非優點。
real-time PCR vs 傳統 PCR
| 項目 | 傳統 PCR | real-time PCR | 備註 |
|---|
| 偵測時機 | 終點偵測 | 每循環即時 | 核心差異 |
| 定量能力 | 半定量 | 精準定量 | 可算起始拷貝數 |
| 靈敏度 | ng 級 | pg-fg 級 | 鑑識微量樣本利器 |
| 設備成本 | 便宜 | 昂貴 (需螢光偵測) | D 選項陷阱 |
| 專一性 | 引子決定 | 引子+探針雙重 | 減少偽陽性 |
D 把「缺點」包裝成「優點」—real-time PCR 最大的門檻正是設備昂貴與需專用儀器。考生若只看到「PCR 機器」四字而忽略「一般」二字，就會誤判為對。記住：精密技術 = 高成本。 
