高考-法醫師法醫生物學109 年第 28 題單選題
以 Real-time PCR 進行 DNA 定量時,主要是利用 Taq DNA polymerase 具有下列何種活性來裂解 TaqMan 探針?
A3'-endonuclease activity
B3'-exonuclease activity
C5'-endonuclease activity
D5'-exonuclease activity正確答案
D正確答案
TaqMan 探針定量 PCR 的核心:利用 Taq 聚合酶的 5'→3' 外切酶活性切斷探針,釋放螢光訊號。
逐選項解析
A3'-endonuclease activity✕ 錯誤
3'-endonuclease(3' 端內切酶)並非 Taq DNA polymerase 具有的活性,屬干擾選項。
B3'-exonuclease activity✕ 易錯陷阱
3'→5' 外切酶活性是「校對功能」(proofreading),存在於高保真聚合酶如 Pfu,但 Taq 缺乏此活性,也非切斷 TaqMan 探針的機制。
C5'-endonuclease activity✕ 易錯陷阱
D5'-exonuclease activity✓ 正確
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