以 SNaPshot（Minisequencing）針對 PCR 產物進行 SNP（Single nucleotide polymorphism）之型別鑑定時，若不考慮 PCR 複製而只考慮定序之步驟，請問下列何種組成不包含在反應物中？
ASNP primer
BdNTP正確答案
CddNTP
DPolymerase
答案與詳解
B
正確答案
SNaPshot 是單鹼基延伸法，只加一個螢光 ddNTP 就終止，所以反應物不含 dNTP。
為什麼答案是 B
SNaPshot 採單鹼基延伸（minisequencing），primer 只延伸一個鹼基後即被 ddNTP 終止，因此反應中不需要 dNTP，這正是題目要選的答案。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 SNaPshot 是單鹼基延伸法，只加一個螢光 ddNTP 就終止，所以反應物不含 dNTP。
秒殺技巧
看到「Minisequencing / 單鹼基延伸」→ 只用 ddNTP 終止反應，dNTP 不需要。逐選項分析
A✕
SNP primer 的 3' 端緊鄰 SNP 位點，是單鹼基延伸的起始引子，必須存在於反應物中。
B✓ 正確
SNaPshot 採單鹼基延伸（minisequencing），primer 只延伸一個鹼基後即被 ddNTP 終止，因此反應中不需要 dNTP，這正是題目要選的答案。
C✕ 陷阱
四種螢光標記的 ddNTP（A/T/C/G 各一色）是 SNaPshot 核心試劑，延伸一個鹼基後即終止，並透過毛細管電泳判讀顏色以鑑定 SNP 型別。
D✕
需要 DNA polymerase（通常為 AmpliTaq FS）催化 primer 3' 端加上互補的 ddNTP，是反應不可或缺的酵素。
SNaPshot vs. PCR vs. Sanger 定序 反應物比較
| 反應 | primer | dNTP | ddNTP | Polymerase |
|---|---|---|---|---|
| PCR 擴增 | ✓ (一對) | ✓ | ✗ | ✓ |
| SNaPshot (Minisequencing) | ✓ (SNP primer) | ✗ | ✓ (4色螢光) | ✓ |
| Sanger 定序 | ✓ (單支) | ✓ | ✓ (少量) | ✓ |
陷阱提醒
考生容易把 SNaPshot 與 Sanger 定序混淆，誤以為兩者都要 dNTP+ddNTP。關鍵差異在於 SNaPshot 只延伸一個鹼基就終止，所以完全不需要 dNTP，只需要四色螢光 ddNTP 即可判讀 SNP 型別。