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高考-法醫師法醫生物學109 年第 24 題單選題考點:嵌入染料非專一考點:dNTP標記不穩

以毛細管電泳進行 STR 型別分析時,使 STR DNA 之 PCR 產物標識(label)螢光染料之最常見方法為下列何者?

A使用 Fluorescent intercalating dye
B使用標識螢光染料之 dNTP
C使 PCR 引子(Primer)之 5'端標識螢光染料正確答案
D使 PCR 引子(Primer)之 3'端標識螢光染料
答案與詳解
C
正確答案
STR 毛細管電泳分析最常用『5′端螢光標記引子』法,讓 PCR 產物帶螢光便於偵測。

逐選項解析

A使用 Fluorescent intercalating dye嵌入染料非專一✕ 易錯陷阱
嵌入型螢光染料(如 EtBr、SYBR Green)會非專一地結合所有雙股 DNA,無法區分不同 STR 基因座,不適合多重 STR 型別分析。
B使用標識螢光染料之 dNTPdNTP標記不穩✕ 錯誤
雖然技術上可用螢光 dNTP,但會造成每條產物標記強度不一、訊號不穩,且成本高,並非 STR 分析的常規做法。
C使 PCR 引子(Primer)之 5'端標識螢光染料✓ 正確
D使 PCR 引子(Primer)之 3'端標識螢光染料✕ 易錯陷阱

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