專技高考-牙醫師(一)牙醫學(一)(包括口腔解剖學、牙體形態學、口腔組織與胚胎學、生物化學等科目及其臨床相關知識)111 年第 68 題單選題
有關蛋白質二維電泳(two-dimensional electrophoresis)的應用敘述,下列何者錯誤?
A先進行等電聚焦電泳(isoelectric focusing,IEF),再進行SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)
B進行IEF時,電泳膠之較低pH一端朝向電泳槽負極,較高pH一端朝向正極正確答案
C完成二維電泳染色後,所顯現的蛋白質可呈現點狀分布
D電泳後所顯現蛋白質的分布圖,一維座標代表分子量,另一維座標代表pH值或等電點
B正確答案
二維電泳先IEF再SDS-PAGE,IEF時低pH端朝正極(非負極),B選項極性敘述相反,為錯誤答案。
為什麼答案是 B
這是本題錯誤選項。IEF電泳中,膠的低pH端(酸性端,富含H⁺)應朝向正極(陽極),高pH端(鹼性端)應朝向負極(陰極)。B選項說低pH朝負極、高pH朝正極,方向完全相反,是典型的極性顛倒陷阱。
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完整詳解
Pro · 無限重點 二維電泳先IEF再SDS-PAGE,IEF時低pH端朝正極(非負極),B選項極性敘述相反,為錯誤答案。
IEF利用pH梯度讓蛋白質移向等電點:H⁺多(低pH)朝正極,OH⁻多(高pH)朝負極,B選項把正負極搞反了。
逐選項分析
A✕
二維電泳的標準流程就是「第一維IEF(依等電點分離)→第二維SDS-PAGE(依分子量分離)」。IEF先在pH梯度膠條上分離,再將膠條橫置於SDS-PAGE膠上進行第二維分離,此敘述完全正確。
B✓ 正確
這是本題錯誤選項。IEF電泳中,膠的低pH端(酸性端,富含H⁺)應朝向正極(陽極),高pH端(鹼性端)應朝向負極(陰極)。B選項說低pH朝負極、高pH朝正極,方向完全相反,是典型的極性顛倒陷阱。
C✕
二維電泳完成染色(常用考馬斯藍或銀染)後,每種蛋白質因有特定的等電點與分子量,會停留在gel上特定的二維座標位置,因此呈現「點狀分布(spot pattern)」。此敘述正確,是蛋白質體學(proteomics)分析的基礎。
D✕
二維電泳的兩個座標軸:第一維(IEF)代表蛋白質的等電點(pI)或pH值;第二維(SDS-PAGE)代表蛋白質的分子量(molecular weight)。此敘述正確描述了二維電泳結果圖的座標意義。
二維電泳(2D Electrophoresis)核心整理
| 維度 | 技術 | 分離依據 | 電極方向 |
|---|
| 第一維 | IEF(等電聚焦) | 等電點(pI) | 低pH端→正極;高pH端→負極 |
| 第二維 | SDS-PAGE | 分子量(MW) | 小分子跑較遠(朝正極) |
| 結果圖 | 染色後 | 點狀分布 | X軸=pI,Y軸=MW |
IEF電泳的極性方向是考試經典陷阱。記憶口訣:「酸正鹼負」——低pH(酸性,富H⁺)端靠近正極,高pH(鹼性)端靠近負極。B選項把兩端的極性完全顛倒,乍看語意通順,但方向全錯。考生常在緊張中忽略正/負極方向的細節。
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