進行PCR所使用之primer，設計時須考量之因子何者較適合？
A長度應為 30～50 bases
BGC 含量應佔 20～30%
Cforward 及 reverse primer 彼此 Tm 值之差異應小於 $10^{\circ}$ C
D最好能少於 4 個相同鹼基的連續出現正確答案
答案與詳解
逐選項解析
A長度應為 30～50 basesprimer長度✕ 易錯陷阱
Primer 長度一般為 18～25 bases（最多不超過 30），太長會降低專一性、延長 annealing 時間，且增加二級結構形成機會。30～50 bases 太長。
BGC 含量應佔 20～30%GC含量✕ 錯誤
GC 含量應為 40～60%，太低會使 Tm 值過低、結合不穩定；太高則易形成二級結構。20～30% 明顯過低。
Cforward 及 reverse primer 彼此 Tm 值之差異應小於 $10^{\circ}$ C✕ 易錯陷阱
D最好能少於 4 個相同鹼基的連續出現✓ 正確
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