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高考-法醫師法醫生物學10421單選題

進行PCR所使用之primer,設計時須考量之因子何者較適合?

A長度應為30~50 bases
BGC含量應佔20~30%
Cforward及reverse primer彼此Tm值之差異應小於10℃
D最好能少於4個相同鹼基的連續出現正確答案
答案與詳解
D
正確答案
PCR primer 設計四大原則:長度 18-25 bp、GC 40-60%、兩 primer Tm 差小於 5°C、避免 4 個以上連續相同鹼基。

為什麼答案是 D

避免 4 個以上相同鹼基連續出現(如 AAAA、GGGG),可防止 mispriming、slippage 及二級結構,提高專一性。此為正確設計原則。

考點:primer長度考點:GC含量考點:Tm值匹配考點:避免連續鹼基
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