高考-法醫師法醫生物學104 年第 20 題單選題考點:兩輪擴增副作用考點:兩階段非同時
關於nested PCR之描述,何者較為合理?
A容易出現非特性PCR產物正確答案
B可同時以兩對引子進行PCR複製以節省分析時間
C不適合應用於微量檢體之分析
D不適合應用於裂解嚴重檢體之分析
A正確答案
Nested PCR 兩輪擴增、兩對引子,極靈敏但易產生非特異性產物與污染風險。
逐選項解析
A容易出現非特性PCR產物兩輪擴增副作用✓ 正確
Nested PCR 進行兩輪擴增,循環數多、模板被反覆放大,容易因引子誤配或污染而產生非特異性產物,這是其最主要缺點。
B可同時以兩對引子進行PCR複製以節省分析時間兩階段非同時✕ 易錯陷阱
Nested PCR 必須『先用外引子擴增,再取產物用內引子第二輪擴增』,兩對引子分兩階段使用,不能同時進行,也不會節省時間,反而更耗時。
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