高考-法醫師法醫生物學110 年第 16 題單選題
關於 RAPD(Randomly amplified polymorphic DNA)之敘述,下列何者正確?
A其使用之引子長度約介於 20 至 30 個核苷酸
B不同實驗室間的再現性(Reproducibility)佳
C其複製產物於電泳膠上形成的複雜樣態(Complex patterns)難以應用於混合檢體之研判正確答案
DRAPD 之再現性與 AFLP(Amplified fragment length polymorphism)差不多
C正確答案
RAPD 用短隨機引子(約10bp)PCR,再現性差、譜帶複雜,不適合混合檢體分析。
逐選項解析
A其使用之引子長度約介於 20 至 30 個核苷酸引子長度✕ 易錯陷阱
RAPD 所用引子長度約 10 個核苷酸(8-12 bp),屬於「短隨機引子」,而非 20-30 bp。這正是它能隨機結合多處位點、產生多條譜帶的原因,但也導致專一性低。
B不同實驗室間的再現性(Reproducibility)佳再現性✕ 錯誤
RAPD 最為人詬病的缺點就是「再現性差」。因引子短、退火溫度低,反應條件(機型、Taq 酶、模板量)稍有差異就會產生不同譜帶,不同實驗室間結果往往難以比對。
C其複製產物於電泳膠上形成的複雜樣態(Complex patterns)難以應用於混合檢體之研判✓ 正確
DRAPD 之再現性與 AFLP(Amplified fragment length polymorphism)差不多✕ 易錯陷阱
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