高考-法醫師法醫生物學110 年第 29 題單選題
下列何引子的 Tm（melting temperature）最高？
A5'-AGGATAACCGGCTCCTCCA正確答案
B5'-AAAATAACTGCCTCGTCCA
C5'-AAAATAACCACCTGGCTCC
D5'-AATATAACGATCTCCTCTA
A正確答案
Tm 由 GC 含量決定,(A) 含 11 個 G/C,GC% 最高,故 Tm 最高。
為什麼答案是 A
AGGATAACCGGCTCCTCCA:GC = 11/19 ≈ 57.9%,Tm 最高 ✓
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 Tm 由 GC 含量決定,(A) 含 11 個 G/C,GC% 最高,故 Tm 最高。
1. Tm 與 GC 含量正相關 (G≡C 為三氫鍵,A=T 為二氫鍵)。
2. 簡易公式:Tm = 2(A+T) + 4(G+C)。
3. 計算各引子 G+C 數:
(A) 11 GC → Tm = 2×8 + 4×11 = 60°C
(B) 9 GC → Tm = 2×10 + 4×9 = 56°C
(C) 10 GC → Tm = 2×9 + 4×10 = 58°C
(D) 7 GC → Tm = 2×12 + 4×7 = 52°C
4. (A) GC 含量最高,Tm 最高。
逐選項分析
A✓ 正確
AGGATAACCGGCTCCTCCA:GC = 11/19 ≈ 57.9%,Tm 最高 ✓
B✕
AAAATAACTGCCTCGTCCA:GC = 9/19 ≈ 47.4%,Tm 較低
C✕
AAAATAACCACCTGGCTCC:GC = 10/19 ≈ 52.6%,中等
D✕
AATATAACGATCTCCTCTA:GC = 7/19 ≈ 36.8%,Tm 最低
關鍵知識表
| Tm 影響因素 | 說明 |
|---|
| GC 含量↑ | Tm↑ (G-C 三氫鍵較 A-T 二氫鍵穩定) |
| 引子長度↑ | Tm↑ |
| 鹽濃度↑ | Tm↑ |
| 簡式公式 | Tm = 2(A+T) + 4(G+C),適用 <20 bp |
| Wallace rule | 短寡核苷酸常用之經驗式 |
計數時須仔細逐個鹼基數 G/C,長度相同時直接比較 GC 數即可,不必算完整 Tm。 
