高考-法醫師法醫生物學110 年第 13 題單選題
關於以 Chelex 萃取 DNA 的方法,下列敘述何者錯誤?
AChelex 為一種離子交換樹脂(Ion-exchange resin)
BChelex 可與鎂離子結合
C反應過程中加熱至 $100^{\circ}$ C 可破壞細胞膜
D萃取所得之 DNA 為雙股 DNA(Double-stranded DNA)正確答案
D正確答案
Chelex 萃取法因高溫煮沸會使 DNA 變性,所得為單股 DNA 而非雙股。
為什麼答案是 D
錯誤!煮沸高溫會使 DNA 雙股氫鍵斷裂變性,所得產物為『單股 DNA』,因此 Chelex 萃取物適用於 PCR(可直接變性),但不適用於需雙股 DNA 的 RFLP 分析。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Chelex 萃取法因高溫煮沸會使 DNA 變性,所得為單股 DNA 而非雙股。
記住口訣:Chelex = 煮沸 + 螯合鎂離子 → 產物是『單股 DNA』,適合 PCR 但不適合 RFLP。
逐選項分析
A✕
Chelex 100 確實是一種苯乙烯二乙烯苯共聚物的離子交換樹脂,帶亞胺基二乙酸官能基,可螯合多價金屬離子,敘述正確。
B✕
Chelex 的核心功能就是螯合二價金屬陽離子(尤其是 Mg²⁺),避免 Mg²⁺ 作為 DNase 輔因子降解 DNA,保護 DNA 完整性,敘述正確。
C✕
萃取流程中會加熱煮沸至 95-100°C,破壞細胞膜與核膜使 DNA 釋出,同時使蛋白質變性,敘述正確。
D✓ 正確
錯誤!煮沸高溫會使 DNA 雙股氫鍵斷裂變性,所得產物為『單股 DNA』,因此 Chelex 萃取物適用於 PCR(可直接變性),但不適用於需雙股 DNA 的 RFLP 分析。
Chelex 萃取法特點整理
| 項目 | 內容 | 原理 | 應用 |
|---|
| 試劑本質 | 離子交換樹脂 | 螯合多價陽離子 | 保護 DNA |
| 關鍵離子 | Mg²⁺ | 移除 DNase 輔因子 | 防止降解 |
| 加熱溫度 | 95-100°C | 破壞細胞膜/使 DNA 變性 | 釋出 DNA |
| 產物型態 | 單股 DNA | 高溫使雙股分離 | 適 PCR、不適 RFLP |
考生容易誤以為 DNA 萃取產物一定是雙股,忽略 Chelex 法『煮沸』步驟會使 DNA 變性為單股。這也是為何 Chelex 萃取物搭配 PCR 使用最佳,但不能做需雙股結構的 RFLP 分析。