高考-法醫師法醫生物學113 年第 12 題單選題
關於 Chelex DNA 萃取方法的敘述,下列何者正確?
A萃取過程可去除鎂離子,增加 DNA 穏定性正確答案
B多次換管操作,容易發生檢體間污染
C最後主要獲得雙股 DNA
D適合用於 RFLP 和 PCR 鑑定方法之 DNA 製備
A正確答案
Chelex-100 是螯合樹脂,可螯合二價金屬離子(如 Mg²⁺),保護 DNA 不被 DNase 降解。
為什麼答案是 A
Chelex-100 為含 iminodiacetate 的螯合樹脂,能結合 Mg²⁺ 等二價金屬離子,抑制 DNase 活性(DNase 需 Mg²⁺),保護 DNA 穩定性。這是 Chelex 法的核心原理。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Chelex-100 是螯合樹脂,可螯合二價金屬離子(如 Mg²⁺),保護 DNA 不被 DNase 降解。
看到 Chelex 就想到「螯合金屬離子、單管操作、產物為單股 DNA、只適用 PCR」。
逐選項分析
A✓ 正確
Chelex-100 為含 iminodiacetate 的螯合樹脂,能結合 Mg²⁺ 等二價金屬離子,抑制 DNase 活性(DNase 需 Mg²⁺),保護 DNA 穩定性。這是 Chelex 法的核心原理。
B✕ 陷阱
Chelex 法最大優點就是「單管操作」(single-tube),不需多次換管,因此污染風險低、步驟快速,特別適合微量檢體。此選項敘述與事實相反。
C✕
Chelex 萃取需經 95-100°C 高溫煮沸步驟,DNA 在此過程中變性,最終得到的主要是「單股 DNA」,而非雙股。這也是為何 Chelex 產物不適合需要雙股的 RFLP。
D✕ 陷阱
因產物為單股且可能含少量雜質,Chelex 法「只適合 PCR」,不適合 RFLP(RFLP 需要高品質雙股 DNA 進行限制酶切割)。考點常在此混淆。
Chelex DNA 萃取法重點整理
| 項目 | 內容 | 優點 | 限制 |
|---|
| 原理 | 螯合 Mg²⁺ 等二價金屬離子 | 抑制 DNase 保護 DNA | 僅萃取非純化 |
| 操作 | 單管、加熱 95-100°C | 快速、污染少 | 產物含雜質 |
| 產物 | 單股 DNA | 適合 PCR 模板 | 不適合 RFLP |
| 應用 | 法醫微量檢體 | 血痕、口腔細胞 | 不適合長期保存 |
選項 B、D 都是常見陷阱:B 把 Chelex「單管操作、污染少」的優點說反;D 誤導考生以為 Chelex 萬用。記住:Chelex = 單股 DNA = 只能 PCR,不能 RFLP。