專技高考-藥師藥物分析與生藥學(包括中藥學)105 年第 33 題單選題
有關電滲透流(EOF)之敘述,下列何者正確?
A進行等電聚焦(isoelectric focusing)需有EOF輔助
B使用teflon材質能增加EOF
C緩衝溶液中添加甲基纖維素(methylcellulose)能抑制EOF正確答案
D電滲透流為毛細管電泳分離蛋白質必要之動力
C正確答案
毛細管電泳中,添加甲基纖維素等高分子聚合物可增加溶液黏度,有效抑制電滲透流(EOF)。
為什麼答案是 C
緩衝溶液中添加甲基纖維素等高分子聚合物,能顯著增加溶液黏度,產生空間位阻並物理性阻礙流體移動,從而有效抑制電滲透流(EOF)。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 毛細管電泳中,添加甲基纖維素等高分子聚合物可增加溶液黏度,有效抑制電滲透流(EOF)。
抑制 EOF 三大法:降 pH、加高分子聚合物(如甲基纖維素)、毛細管內壁塗層(如 Teflon)。
逐選項分析
A✕
等電聚焦(IEF)需建立並維持穩定的 pH 梯度,電滲透流會破壞此梯度造成干擾,因此進行 IEF 時必須抑制 EOF,而非依賴其輔助。
B✕
Teflon(聚四氟乙烯)為疏水性材質,表面電荷極低或呈中性。將其塗佈於毛細管內壁可覆蓋矽羥基,大幅降低表面負電荷密度,使 EOF 極小甚至接近零,從而顯著「抑制」電滲透流,而非增加 EOF。
C✓ 正確
緩衝溶液中添加甲基纖維素等高分子聚合物,能顯著增加溶液黏度,產生空間位阻並物理性阻礙流體移動,從而有效抑制電滲透流(EOF)。
D✕ 陷阱
電滲透流雖為毛細管電泳常見之動力,但在分離蛋白質時,常因蛋白質易吸附於管壁或為提升解析度而刻意抑制 EOF,故並非分離蛋白質之「必要」動力。
電滲透流(EOF)調控方法對照表
| 調控方向 | 具體方法 | 作用原理 |
|---|
| 增加 EOF | 提高緩衝液 pH 值 | 使毛細管內壁矽羥基去質子化,增加表面負電荷 |
| 抑制 EOF | 降低緩衝液 pH 值 | 減少矽羥基去質子化,降低內壁負電荷 |
| 抑制 EOF | 添加高分子聚合物(如甲基纖維素) | 增加緩衝液黏度,物理性阻礙流體移動 |
| 抑制 EOF | 毛細管內壁塗層(如 Teflon) | 覆蓋矽羥基,減少表面電荷與非特異性吸附 |
考生易誤以為電滲透流(EOF)是所有毛細管電泳分離的絕對必要動力。實際上,在分離蛋白質或進行等電聚焦時,EOF 往往會造成干擾,必須加以抑制。