專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學105 年第 12 題單選題
下列何種檢測方法用於辨識培養的細胞群中是否有分泌特定細胞激素的細胞？
Alymphocyte proliferation test
BRT-PCR
Ccytotoxicity assay
DELISPOT assay正確答案
D正確答案
ELISPOT 在細胞層次偵測單一細胞分泌細胞激素，可計算分泌特定激素的細胞數量。
為什麼答案是 D
ELISPOT 在包被抗體的孔盤上培養細胞，分泌的細胞激素被原位捕捉形成 spot，每個 spot = 一個分泌細胞，可定量「會分泌特定 cytokine 的細胞數」，是單細胞層次的分泌偵測金標準。
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完整詳解
Pro · 無限重點 ELISPOT 在細胞層次偵測單一細胞分泌細胞激素，可計算分泌特定激素的細胞數量。
看到「辨識細胞群中『會分泌』特定細胞激素的細胞數」→ 直接選 ELISPOT。ELISA 測量、ELISPOT 數細胞。
逐選項分析
A✕
淋巴球增殖試驗是用 ³H-thymidine 或 BrdU/CFSE 測淋巴球受抗原刺激後的增殖能力，看的是「細胞分裂」，不是細胞激素分泌。
B✕ 陷阱
RT-PCR 偵測 mRNA 表現量，可知細胞群「整體」是否轉錄細胞激素基因，但無法分辨「哪些細胞、有多少細胞」在分泌，且 mRNA ≠ 實際分泌蛋白。
C✕
細胞毒殺試驗（如 ⁵¹Cr release、LDH assay）測 CTL 或 NK 細胞殺死標靶細胞的能力，與細胞激素分泌偵測無關。
D✓ 正確
ELISPOT 在包被抗體的孔盤上培養細胞，分泌的細胞激素被原位捕捉形成 spot，每個 spot = 一個分泌細胞，可定量「會分泌特定 cytokine 的細胞數」，是單細胞層次的分泌偵測金標準。
細胞激素相關檢測方法比較
| 方法 | 偵測層次 | 偵測標的 | 用途 |
|---|
| ELISA | 群體 (上清液) | 分泌的 cytokine 蛋白濃度 | 測總分泌量 |
| ELISPOT | 單細胞 | 分泌 cytokine 的細胞 | 數分泌細胞數 |
| RT-PCR | 群體 | cytokine mRNA | 看基因表現 |
| Intracellular staining + FACS | 單細胞 | 細胞內 cytokine + 表面標記 | 鑑定分泌細胞種類 |
| Proliferation test | 群體 | DNA 合成 | 看活化增殖 |
RT-PCR 是常見誘答陷阱：它測 cytokine mRNA，看似可以判斷「有沒有產生細胞激素」，但題目問的是「辨識培養細胞群中『分泌』的細胞」。RT-PCR 只能告訴你整體 mRNA 量，不能定位到單一分泌細胞，且 mRNA 表現不等於蛋白實際分泌出細胞外。 
