專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學114 年第 40 題單選題
下列何種檢測方法最適合用來評估可產生 IFN- γ 的 CD8 T 細胞比例？
AEnzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）
BWestern blot
CReal-time polymerase chain reaction
DFlow cytometry正確答案
D正確答案
要測「特定細胞族群」產生細胞激素的比例，只有流式細胞儀能同時做到單細胞層次的多參數分析。
為什麼答案是 D
Flow cytometry 配合細胞內染色（ICS），可同時標記 CD8 表面抗原與胞內 IFN-γ，在單細胞層次計算「CD8+IFN-γ+」細胞佔 CD8 T 細胞的百分比。
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完整詳解
Pro · 無限重點 要測「特定細胞族群」產生細胞激素的比例，只有流式細胞儀能同時做到單細胞層次的多參數分析。
看到『比例 + 特定細胞亞群』直接選 Flow cytometry，這是細胞免疫學鐵則。
逐選項分析
A✕ 陷阱
ELISA 只能測上清液中 IFN-γ 總量，無法區分是哪種細胞分泌，也無法算出 CD8 T 細胞的比例。
B✕
Western blot 是偵測蛋白質表現與分子量，屬於群體細胞裂解液分析，無法評估單一細胞層次的比例。
C✕
Real-time PCR 測的是 mRNA 表現量，屬於核酸層次且為群體平均值，無法得知產生 IFN-γ 的 CD8 T 細胞佔多少比例。
D✓ 正確
Flow cytometry 配合細胞內染色（ICS），可同時標記 CD8 表面抗原與胞內 IFN-γ，在單細胞層次計算「CD8+IFN-γ+」細胞佔 CD8 T 細胞的百分比。
免疫學檢測方法比較
| 方法 | 偵測對象 | 單細胞分析 | 適用場景 |
|---|
| ELISA | 可溶性蛋白/抗體 | 否 | 血清細胞激素總量 |
| Western blot | 蛋白質 + 分子量 | 否 | 蛋白表現確認 |
| Real-time PCR | mRNA/DNA | 否 | 基因表現量 |
| Flow cytometry | 細胞表面+胞內分子 | 是 | 細胞亞群比例 |
| ELISpot | 分泌細胞激素的細胞數 | 半定量 | 抗原專一性 T 細胞計數 |
ELISA 是測 IFN-γ 最經典的方法，考生容易直覺選 A。但題目關鍵字是「CD8 T 細胞比例」—— 要的是細胞層次的百分比，而非細胞激素濃度，必須用 Flow cytometry 做 intracellular cytokine staining (ICS)。 
