專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學105 年第 75 題單選題
某病毒的檢測，使用免疫螢光染色，其中常使用並產生綠色螢光以供辨識的標幟物是：
Aalkaline phosphatase
Brhodamine isothiocyanate
Cperoxidase
Dfluorescein isothiocyanate正確答案
D正確答案
FITC（fluorescein isothiocyanate）是免疫螢光染色最常用的綠色螢光標記物，激發後發出蘋果綠螢光。
為什麼答案是 D
FITC 是免疫螢光染色（IFA）最經典的綠色螢光標記，激發波長約 495 nm，發射波長約 519 nm，呈現蘋果綠螢光，廣泛用於病毒抗原偵測。
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完整詳解
Pro · 無限重點 FITC（fluorescein isothiocyanate）是免疫螢光染色最常用的綠色螢光標記物，激發後發出蘋果綠螢光。
看到「綠色螢光」直接想 FITC；看到「紅色螢光」想 Rhodamine 或 TRITC，二選一秒殺。
逐選項分析
A✕
鹼性磷酸酶是酵素免疫染色（IHC/ELISA）用的酵素標記，搭配受質後產生有色沉澱物，不是螢光標記，不會發綠色螢光。
B✕ 陷阱
Rhodamine isothiocyanate（TRITC）確實是螢光染料，但激發後產生的是紅色（橘紅）螢光，常與 FITC 搭配做雙染對照，不是綠色螢光。
C✕
Peroxidase（HRP，辣根過氧化酶）也是酵素免疫染色常用標記，搭配 DAB 受質產生棕色沉澱，屬於 enzyme-linked 系統而非螢光系統。
D✓ 正確
FITC 是免疫螢光染色（IFA）最經典的綠色螢光標記，激發波長約 495 nm，發射波長約 519 nm，呈現蘋果綠螢光，廣泛用於病毒抗原偵測。
免疫染色常見標記物對照
| 標記物 | 類型 | 產生顏色 | 常見用途 |
|---|
| FITC | 螢光染料 | 綠色螢光 | 免疫螢光染色 (IFA) |
| Rhodamine / TRITC | 螢光染料 | 紅色螢光 | 雙染對照 |
| HRP (Peroxidase) | 酵素 | 棕色沉澱 (DAB) | IHC、ELISA |
| Alkaline phosphatase | 酵素 | 藍紫/紅色沉澱 | IHC、ELISA、Western |
免疫螢光染色最容易搞混的就是 FITC 跟 rhodamine，兩者都帶 isothiocyanate 偶聯基團，但發光顏色完全不同。判斷核心在「fluorescein」這個字根代表螢光素本身就是綠色螢光物質,激發後發出蘋果綠光；rhodamine 字根來自玫瑰紅,發的是橘紅色光。另外要小心 HRP 和 alkaline phosphatase 是酵素標記,靠呈色反應而非螢光,常被拿來混淆螢光標記系統。記住 FITC = fluorescein = 綠,是免疫螢光最經典的標記物。 
