專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學107 年第 53 題單選題
下列敘述何者正確?
Atrypan blue常被用於活細胞計數染色之用,活細胞可染成藍色
B冰凍細胞,以dimethyl sulfoxide為冰凍保存劑正確答案
C冰凍細胞,要快速降溫
D解凍細胞,要分段緩慢提高溫度
B正確答案
細胞冷凍保存的標準操作:用 DMSO 當保護劑、慢速降溫、快速解凍,trypan blue 只染死細胞。
為什麼答案是 B
DMSO(dimethyl sulfoxide)是最常用的細胞冷凍保護劑,能滲入細胞內降低冰晶形成、保護細胞膜,常配合血清以約 5~10% 濃度使用。敘述正確,為本題答案。
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完整詳解
Pro · 無限重點 細胞冷凍保存的標準操作:用 DMSO 當保護劑、慢速降溫、快速解凍,trypan blue 只染死細胞。
記口訣「慢凍快解」+ DMSO 保護劑;trypan blue 染「死」不染活,藍色=死細胞。
逐選項分析
A✕ 陷阱
trypan blue(台盼藍)確實用於活細胞計數,但原理是「死細胞膜破損才會被染藍」,活細胞膜完整、染料無法進入而不著色。敘述把活/死染色結果寫反了。
B✓ 正確
DMSO(dimethyl sulfoxide)是最常用的細胞冷凍保護劑,能滲入細胞內降低冰晶形成、保護細胞膜,常配合血清以約 5~10% 濃度使用。敘述正確,為本題答案。
C✕
冷凍細胞應「緩慢降溫」(約每分鐘降 1°C),讓水分逐步移出、避免細胞內形成大冰晶造成機械性破壞。快速降溫會導致冰晶傷害,敘述錯誤。
D✕ 陷阱
解凍細胞應「快速升溫」(如 37°C 水浴迅速融化),避免回溫過程中再結晶傷害細胞。分段緩慢提高溫度反而有害,敘述錯誤。口訣為「慢凍快解」。
細胞冷凍保存標準流程
| 步驟 | 正確做法 | 原因 | 錯誤迷思 |
|---|
| 保護劑 | DMSO 或甘油 | 減少冰晶、保護細胞膜 | 不加保護劑→冰晶破壞 |
| 降溫 | 慢速(約 1°C/min) | 水分逐步移出 | 快速降溫→大冰晶 |
| 解凍 | 快速(37°C 水浴) | 避免再結晶 | 緩慢回溫→傷害細胞 |
| 活性檢測 | trypan blue | 死細胞染藍 | 誤以為活細胞染藍 |
本題集中考「方向相反」的陷阱:A 把 trypan blue 活/死染色結果寫反;C、D 把「慢凍快解」原則完全顛倒。考生若只記得「慢、快」字眼而沒對應到冷凍或解凍,極易選錯。