專技高考-牙醫師(一)牙醫學(一)(包括口腔解剖學、牙體形態學、口腔組織與胚胎學、生物化學等科目及其臨床相關知識)108 年第 78 題單選題
使用分光光度計(spectrophotometer)分析核酸(nucleic acids)的濃度,主要以下列那一波長測量紫外光吸光度?
A220 nm
B240 nm
C260 nm正確答案
D280 nm
C正確答案
核酸(DNA/RNA)的最大紫外光吸收波長為 260 nm,蛋白質則為 280 nm,這是分光光度計定量的黃金法則。
為什麼答案是 C
核酸中的嘌呤(purine)與嘧啶(pyrimidine)鹼基含共軛雙鍵環狀結構,最大紫外光吸收峰落在 260 nm,這是分光光度計定量 DNA/RNA 的標準波長。
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完整詳解
Pro · 無限重點 核酸(DNA/RNA)的最大紫外光吸收波長為 260 nm,蛋白質則為 280 nm,這是分光光度計定量的黃金法則。
口訣:「核酸 260、蛋白 280」。A260/A280 比值用來評估純度(DNA 約 1.8、RNA 約 2.0)。
逐選項分析
A✕
220 nm 主要用於肽鍵(peptide bond)吸收,可偵測蛋白質但非核酸主要波長,不是核酸定量的標準波長。
B✕
240 nm 沒有特別生化意義,既非核酸也非蛋白質的最大吸收峰,是干擾選項。
C✓ 正確
核酸中的嘌呤(purine)與嘧啶(pyrimidine)鹼基含共軛雙鍵環狀結構,最大紫外光吸收峰落在 260 nm,這是分光光度計定量 DNA/RNA 的標準波長。
D✕ 陷阱
280 nm 是蛋白質(特別是色胺酸 Trp、酪胺酸 Tyr 的芳香環)的最大吸收波長,常用於蛋白質定量,是最容易混淆的陷阱選項。
分光光度計常用波長對照
| 波長 | 主要吸收物質 | 原因 | 用途 |
|---|
| 260 nm | 核酸 (DNA/RNA) | 嘌呤、嘧啶共軛環 | 核酸定量 |
| 280 nm | 蛋白質 | Trp、Tyr 芳香環 | 蛋白質定量 |
| A260/A280 | 純度比值 | DNA≈1.8, RNA≈2.0 | 純度評估 |
| 230 nm | 酚類、醣類污染 | 多醣、有機溶劑殘留 | 污染檢測 |
分光光度計定量生物分子時,核酸和蛋白質各有專屬波長:核酸(DNA/RNA)吸收峰在 260 nm,蛋白質則在 280 nm。這組數字必須成對記憶,因為出題者最愛測「誰是誰」——看到核酸就要反射性想到 260,看到蛋白質才是 280。判斷關鍵在於「題目問的分子是什麼」,而非「哪個波長比較常見」。實驗室實務上也用 260/280 比值判斷核酸純度,比值偏低代表蛋白質汙染,這能幫助你記住兩者差異:260 是核酸主場,280 是蛋白質地盤。
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