專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)115 年第 69 題單選題
王小明剛被任命為 PCR 儀器的負責人,有關與前一任負責人交接的作法中,下列何者最不適當?
APCR 儀器每年度需請工程師以校正過的溫度計進行溫度查驗,查驗的溫度點以反應條件中的最高溫度(denaturation 所需溫度)即可正確答案
B將 PCR 儀器的反應條件,依據不同檢驗項目鎖定,避免被不小心異動
CPCR 檢測項目每個月計算陽性率,當波動太大時,要檢視是否有污染或儀器、試劑效能不足等可能的問題
D當發現 PCR 的反應條件需要調整時,需準備適當數量的檢體,進行確證試驗比較調整前後反應結果
A正確答案
PCR 溫度校正必須涵蓋變性、退火、延伸等所有關鍵溫度點,僅查驗最高溫無法確保整體反應準確性。
為什麼答案是 A
PCR 溫度校正必須涵蓋變性、退火與延伸等所有關鍵溫度點,僅查驗最高溫無法確保退火等關鍵溫度的準確性,故此作法最不適當。
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完整詳解
Pro · 無限重點 PCR 溫度校正必須涵蓋變性、退火、延伸等所有關鍵溫度點,僅查驗最高溫無法確保整體反應準確性。
PCR 溫度校正需涵蓋所有溫度階段,只看最高溫會漏掉退火等關鍵溫度的誤差,影響特異性。
逐選項分析
A✓ 正確
PCR 溫度校正必須涵蓋變性、退火與延伸等所有關鍵溫度點,僅查驗最高溫無法確保退火等關鍵溫度的準確性,故此作法最不適當。
B✕
鎖定反應條件可防止人員誤觸修改引數,是標準的儀器管理與品質保證作法,敘述正確。
C✕
監控陽性率是品質管理的重要環節,異常波動可協助及早發現汙染或試劑失效等問題,敘述正確。
D✕
調整反應條件前進行確效試驗,比較新舊條件結果,能確保調整後的檢驗準確性與可靠性,敘述正確。
PCR 儀器品質保證與管理重點
| 管理專案 | 正確作法 | 目的與重要性 |
|---|
| 溫度校正 | 涵蓋變性、退火、延伸等所有關鍵溫度點 | 確保各階段反應特異性與效率 |
| 引數管理 | 鎖定不同檢驗項目的反應條件 | 防止人員誤觸修改,維持檢驗一致性 |
| 結果監控 | 定期計算並追蹤陽性率 | 及早發現偽陽性(汙染)或偽陰性(失效) |
| 條件調整 | 調整前進行確效試驗並比較結果 | 確保新條件的準確性與臨床適用性 |
選項 A 誤導考生以為溫度校正只需確認極端值。實際上,PCR 的退火溫度對引子結合的特異性至關重要,若退火溫度不準確,會導致非特異性放大或反應失敗,因此必須校驗所有關鍵溫度點。