專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)115 年第 63 題單選題
下列那種溶液常用於傳統的 Southern blotting,可透過毛細作用將 DNA 轉漬(transfer)到硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)上?
Aphosphate-buffered saline(PBS)
Bsaline sodium citrate(SSC)正確答案
CTris acetate EDTA(TAE)
DTris-EDTA(TE)
B正確答案
Southern blotting 傳統轉漬使用 SSC (Saline Sodium Citrate) 緩衝液,利用毛細作用將 DNA 轉印至硝酸纖維素膜。
為什麼答案是 B
SSC (Saline Sodium Citrate) 是 Southern blotting 傳統轉漬的標準緩衝液,提供高鹽環境幫助 DNA 結合於硝酸纖維素膜上。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Southern blotting 傳統轉漬使用 SSC (Saline Sodium Citrate) 緩衝液,利用毛細作用將 DNA 轉印至硝酸纖維素膜。
Southern blot 轉印液 = SSC;電泳液 = TAE/TBE;儲存液 = TE。看到 DNA 轉漬直接選 SSC!
逐選項分析
A✕
PBS 常用於西方墨點法 (Western blot) 或免疫染色的洗滌緩衝液,不具 DNA 轉漬功能。
B✓ 正確
SSC (Saline Sodium Citrate) 是 Southern blotting 傳統轉漬的標準緩衝液,提供高鹽環境幫助 DNA 結合於硝酸纖維素膜上。
C✕ 陷阱
TAE (Tris-Acetate-EDTA) 為 DNA 瓊脂糖凝膠電泳時常用的緩衝液,主要維持 pH 與導電度,非用於轉漬步驟。
D✕
TE (Tris-EDTA) 主要用於 DNA 萃取後的長期儲存,其中的 EDTA 能螯合金屬離子以防止 DNA 被降解,不用於轉漬。
分子生物學常用緩衝液對照表
| 緩衝液 | 英文縮寫 | 主要用途 | 應用技術 |
|---|
| 檸檬酸鹽生理食鹽水 | SSC | DNA 轉漬與雜交 | Southern blotting |
| 三羥甲基胺基甲烷-醋酸-EDTA | TAE | DNA 瓊脂糖凝膠電泳 | Agarose gel electrophoresis |
| 三羥甲基胺基甲烷-EDTA | TE | DNA 長期儲存 | DNA storage |
| 磷酸鹽緩衝生理食鹽水 | PBS | 蛋白質洗滌與稀釋 | Western blotting / ELISA |
考生易將電泳緩衝液 (TAE/TBE) 與轉漬緩衝液 (SSC) 混淆。記住:電泳用 TAE/TBE,轉漬到膜上用 SSC,儲存用 TE,西方墨點法洗滌用 PBS 或 TBS。