專技高考-牙醫師(一)牙醫學(一)（包括口腔解剖學、牙體形態學、口腔組織與胚胎學、生物化學等科目及其臨床相關知識）107 年第 79 題單選題
一蛋白質混合液含有A和B兩種形狀相似的蛋白質，A之分子量 = 45000 Da，等電點（pI）= 5.8，B之分子量 = 45500 Da，pI = 8.5。下列那一項技術最適用於分離A和B蛋白質？
A分子大小排除法（size exclusion chromatography）
B離子交換層析法（ion exchange chromatography）正確答案
CSDS-聚丙烯醯胺電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis）
D超高速離心（ultracentrifugation）
B正確答案
兩蛋白分子量幾乎相同(45000 vs 45500)但pI差很大(5.8 vs 8.5)，靠電荷分離最有效，選離子交換層析。
為什麼答案是 B
離子交換層析依蛋白質淨電荷分離。兩者pI差距大(5.8 vs 8.5)，在適當pH下帶不同淨電荷，與管柱結合力不同，可有效分離，是最佳選擇。
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完整詳解
Pro · 無限重點 兩蛋白分子量幾乎相同(45000 vs 45500)但pI差很大(5.8 vs 8.5)，靠電荷分離最有效，選離子交換層析。
看差異：分子量差<1%(沒救)、pI差2.7(超明顯)→電荷分離=離子交換層析。
逐選項分析
A✕ 陷阱
分子大小排除法（凝膠過濾）依分子量/大小分離。但A=45000、B=45500，差距僅約1%，根本分不開，無法達到分離目的。
B✓ 正確
離子交換層析依蛋白質淨電荷分離。兩者pI差距大(5.8 vs 8.5)，在適當pH下帶不同淨電荷，與管柱結合力不同，可有效分離，是最佳選擇。
C✕
SDS-PAGE使蛋白變性並帶均一負電荷，純粹依分子量分離。45000與45500差異太小，在膠上幾乎重疊無法區分，且為變性分析非製備分離。
D✕
超高速離心依沉降係數(與分子量、形狀相關)分離。兩蛋白形狀相似且分子量幾乎相同，沉降行為近乎一致，無法有效分開。
蛋白質純化技術分離依據
| 技術 | 分離依據 | 本題能否分開 | 原因 |
|---|
| 分子大小排除法 | 分子大小/量 | 否 | MW差<1% |
| 離子交換層析 | 淨電荷(pI) | 是 | pI差2.7 |
| SDS-PAGE | 分子量(變性) | 否 | MW差太小 |
| 超高速離心 | 沉降係數 | 否 | 大小形狀皆似 |
本題關鍵在比較兩個參數的差異幅度：分子量幾乎相同(陷阱選項A、C、D都依大小/分子量)，唯有pI差距明顯。要選『差異最大的性質』對應的分離技術，才能達到分離效果。
牙醫學(一)（包括口腔解剖學、牙體形態學、口腔組織與胚胎學、生物化學等科目及其臨床相關知識） 相關題目
