專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學109 年第 8 題單選題
下列何種方法最主要用來分離淋巴球?
A密度梯度離心法(density gradient centrifugation)正確答案
B沈澱反應(precipitation)
C放射免疫分析法(radioimmunoassay)
D細胞毒殺試驗(cytotoxicity test)
A正確答案
Ficoll-Paque 密度梯度離心法是分離周邊血淋巴球(PBMC)的黃金標準方法。
為什麼答案是 A
密度梯度離心法(常用 Ficoll-Paque, 密度 1.077 g/mL)利用各血球密度差異,離心後淋巴球與單核球聚集於 Ficoll 與血漿交界處(buffy coat),紅血球與顆粒球則沈降至管底,是分離 PBMC 的標準方法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Ficoll-Paque 密度梯度離心法是分離周邊血淋巴球(PBMC)的黃金標準方法。
看到「分離淋巴球」直接想到 Ficoll → 密度梯度離心,這是免疫實驗最基本操作。
逐選項分析
A✓ 正確
密度梯度離心法(常用 Ficoll-Paque, 密度 1.077 g/mL)利用各血球密度差異,離心後淋巴球與單核球聚集於 Ficoll 與血漿交界處(buffy coat),紅血球與顆粒球則沈降至管底,是分離 PBMC 的標準方法。
B✕
沈澱反應是抗原與抗體結合形成可見沈澱物的免疫檢測方法(如免疫擴散、免疫比濁),用於偵測或定量蛋白質,與細胞分離無關。
C✕
放射免疫分析法(RIA)是利用放射性同位素標記抗原或抗體,檢測微量物質(如荷爾蒙、藥物)濃度的定量分析方法,並非用於分離細胞。
D✕ 陷阱
細胞毒殺試驗是評估 NK 細胞或 CTL 殺傷標的細胞能力的功能性試驗(如 51Cr release assay),用於檢測細胞功能,而非分離淋巴球;易與淋巴球相關實驗混淆。
淋巴球分離與相關免疫技術比較
| 方法 | 原理 | 用途 | 備註 |
|---|
| 密度梯度離心法 | Ficoll 密度差 | 分離 PBMC(淋巴球+單核球) | 密度 1.077 g/mL |
| 沈澱反應 | Ag-Ab 結合形成沈澱 | 蛋白質定性/定量 | 免疫擴散、比濁法 |
| 放射免疫分析法 | 放射性標記競爭結合 | 微量物質定量 | 高靈敏度 |
| 細胞毒殺試驗 | 測量標的細胞死亡 | 評估 NK/CTL 功能 | 非分離用途 |
本題易誤選 D,因為「淋巴球」與「細胞毒殺試驗」常一起出現於免疫實驗。但細胞毒殺試驗是評估淋巴球(CTL/NK)的「功能」,不是用來「分離」淋巴球。要清楚區分「分離技術」與「功能檢測」兩類實驗目的。