專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）106 年第 51 題單選題
有關脈衝式電泳分析（pulsed-field gel electrophoresis）的敘述，下列何者正確？
A對不同細菌菌種，所使用的限制酶（restriction endonucleases）均要相同
B電泳主要分析DNA片段範圍在10 kb以下
C電泳分析前，需以PCR增幅所萃取的DNA
D電泳分析後，即可用於細菌分型正確答案
D正確答案
PFGE 是細菌分子分型黃金標準，用稀有切點限制酶切染色體後脈衝電泳，分析大片段 DNA 圖譜直接分型。
為什麼答案是 D
正確。PFGE 切割後產生的條帶圖譜（pulsotype）具高度判別力，可比對菌株親緣關係，是流行病學調查與院內感染溯源的細菌分型黃金標準（gold standard），CDC PulseNet 系統長年採用。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 PFGE 是細菌分子分型黃金標準，用稀有切點限制酶切染色體後脈衝電泳，分析大片段 DNA 圖譜直接分型。
看到「細菌分型 gold standard」就想到 PFGE，重點：大片段 DNA + 限制酶切 + 不需 PCR。
逐選項分析
A✕ 陷阱
錯誤。不同菌種 GC 含量與基因組序列不同，需選擇適合該菌種的稀有切點限制酶。例如 Salmonella 常用 XbaI、Staphylococcus 常用 SmaI、Listeria 常用 ApaI，不能一體適用。
B✕ 陷阱
錯誤。PFGE 最大優勢就是能分離 10 kb 至 10 Mb 的超大 DNA 片段，正是傳統電泳做不到的範圍。10 kb 以下用一般瓊脂糖電泳即可，不需 PFGE。
C✕ 陷阱
錯誤。PFGE 是直接分析細菌完整染色體 DNA，將菌包埋於 agarose plug 中原位裂解後切割，完全不需 PCR 增幅。這也是 PFGE 與 RAPD、AFLP 等技術的關鍵差異。
D✓ 正確
正確。PFGE 切割後產生的條帶圖譜（pulsotype）具高度判別力，可比對菌株親緣關係，是流行病學調查與院內感染溯源的細菌分型黃金標準（gold standard），CDC PulseNet 系統長年採用。
PFGE 核心特色速記
| 項目 | 內容 | 對比技術 | 備註 |
|---|
| 分析範圍 | 10 kb–10 Mb 大片段 | 一般電泳 <50 kb | 電場週期性變換方向 |
| DNA 來源 | 完整染色體（plug 包埋） | PCR 不需要 | 避免 DNA 斷裂 |
| 限制酶 | 稀有切點酶（rare cutter） | 依菌種選擇 | XbaI/SmaI/ApaI 等 |
| 主要用途 | 細菌分子分型 | 院內感染溯源 | PulseNet 標準 |
本題三個錯誤選項都在「反向描述」PFGE 的特色：A 把「依菌種選酶」說成「都用同款」、B 把「大片段」說成「10 kb 以下」、C 把「不需 PCR」說成「需 PCR」。記住 PFGE 就是為大 DNA 而生，且直接分析全染色體。
微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌） 相關題目
