專技高考-藥師藥物分析與生藥學(包括中藥學)106 年第 36 題單選題
使用逆相層析法分析bupivacaine(pKa 8.1),動相組成為乙腈/0.1 M Tris(pH 9.0)(8:2),bupivacaine在一分鐘內被沖提出,下列何種作法無法延長bupivacaine的滯留時間?
A降低乙腈的比例
B使用更長的管柱
C將緩衝溶液改為乙酸(pH 5.0)正確答案
D降低流速
C正確答案
逆相層析中,弱鹼在低pH下解離為極性離子態,與非極性固定相親合力降低,導致滯留時間縮短而非延長。
為什麼答案是 C
將pH降至5.0(低於pKa 8.1),bupivacaine會解離為帶電的極性離子態,在逆相層析中與非極性固定相親合力大幅下降,反而會縮短滯留時間,無法達到延長目的。
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完整詳解
Pro · 無限重點 逆相層析中,弱鹼在低pH下解離為極性離子態,與非極性固定相親合力降低,導致滯留時間縮短而非延長。
逆相層析看極性:pH降低使弱鹼解離變極性,極性物質在逆相管柱跑得快(滯留短),故選C。
逐選項分析
A✕
降低有機溶劑(乙腈)比例會增加動相極性,使非極性分析物在固定相保留更強,從而延長滯留時間。
B✕
增加管柱長度會增加分析物在固定相中的分配次數與路徑,直接延長滯留時間。
C✓ 正確
將pH降至5.0(低於pKa 8.1),bupivacaine會解離為帶電的極性離子態,在逆相層析中與非極性固定相親合力大幅下降,反而會縮短滯留時間,無法達到延長目的。
D✕
降低動相流速會使分析物透過管柱所需的時間增加,直接延長滯留時間。
逆相層析法(RPC)延長滯留時間的常用策略
| 調整引數 | 具體作法 | 對分析物的影響 | 滯留時間變化 |
|---|
| 動相組成 | 降低有機溶劑(如乙腈)比例 | 動相極性增加,分析物更傾向固定相 | 延長 |
| 管柱規格 | 使用更長或內徑更小的管柱 | 增加理論板數與分配次數 | 延長 |
| 流速控制 | 降低動相流速 | 分析物移動速度變慢 | 延長 |
| pH值(弱鹼) | 提高pH(>pKa) | 維持非解離態(非極性),增加保留 | 延長 |
| pH值(弱鹼) | 降低pH(<pKa) | 轉為解離態(極性),減少保留 | 縮短 |
考生易誤以為改變pH值一定能延長滯留時間,卻忽略弱鹼在低pH下會解離成極性離子態。在逆相層析中,極性物質反而跑得快,導致滯留時間縮短,與預期相反。