專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學113 年第 48 題單選題
有關應用LAMP(loop-mediated isothermal amplification)技術於病毒快速診斷的敘述,下列何者最不適當?
A主要使用一種DNA polymerase進行反應
B只需要兩對具專一性的引子進行反應正確答案
C可用螢光方式進一步設計成可以定量的檢測方式Q-LAMP(Quantitative-LAMP)
D目前已有產品應用此技術於病毒檢測
B正確答案
LAMP 等溫核酸增幅技術,使用具股置換能力的 DNA polymerase,需要 4 至 6 個引子辨識 6 個區域,並非僅兩對引子,故 B 最不適當。
為什麼答案是 B
LAMP 的核心特色是使用 4 至 6 個引子(FIP、BIP、F3、B3,可再加 loop primer),辨識標的的 6 個區域以提升專一性。說「只需要兩對引子」並不正確,為最不適當的敘述。
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完整詳解
Pro · 無限重點 LAMP 等溫核酸增幅技術,使用具股置換能力的 DNA polymerase,需要 4 至 6 個引子辨識 6 個區域,並非僅兩對引子,故 B 最不適當。
記住 LAMP 靠多引子(4-6 條)辨識多區域才能高專一性,「只需兩對引子」是錯的。
逐選項分析
A✕
LAMP 使用具股置換(strand displacement)活性的 DNA polymerase(如 Bst polymerase)在恆溫下進行擴增,毋需熱循環機。敘述正確,故非答案。
B✓ 正確
LAMP 的核心特色是使用 4 至 6 個引子(FIP、BIP、F3、B3,可再加 loop primer),辨識標的的 6 個區域以提升專一性。說「只需要兩對引子」並不正確,為最不適當的敘述。
C✕
LAMP 可結合螢光染料或探針,發展為定量的 Q-LAMP(即時偵測),用於量化病毒核酸。敘述正確,故非答案。
D✕
LAMP 已商品化並應用於多種病毒(如 SARS-CoV-2、流感、登革熱等)快速檢測,敘述正確,故非答案。
LAMP 技術重點整理
| 項目 | 內容 |
|---|
| 反應溫度 | 恆溫 60-65°C,不需熱循環 |
| 酶 | 具股置換活性的 Bst DNA polymerase |
| 引子數 | 4-6 個(辨識 6 個區域) |
| 偵測方式 | 濁度、螢光、比色,可定量(Q-LAMP) |
考生易把 PCR 的「一對引子」概念套用到 LAMP。實際上 LAMP 需要 4-6 個引子(內引子 FIP/BIP、外引子 F3/B3,外加環引子)辨識 6 個目標區域,這正是其高專一性的關鍵,絕非「只需兩對引子」。