在進行蛋白質定序時，若使用到 dithiothreitol，則其目的是下列何者？
A用以破壞蛋白質之雙硫鍵正確答案
B用以破壞蛋白質之氫鍵
C用以破壞蛋白質之親水性交互作用
D用以破壞蛋白質之疏水性交互作用
答案與詳解
A
正確答案
DTT（二硫蘇糖醇）是經典還原劑，用來打斷蛋白質中 cysteine 間的 disulfide bond（-S-S-）。
為什麼答案是 A
DTT 為強還原劑，可將雙硫鍵 (-S-S-) 還原成兩個 -SH，使蛋白質次單元解離、展開，便於後續定序（如 Edman degradation）進行。
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完整詳解
Pro · 無限重點 DTT（二硫蘇糖醇）是經典還原劑，用來打斷蛋白質中 cysteine 間的 disulfide bond（-S-S-）。
秒殺技巧
看到 DTT、β-mercaptoethanol、TCEP → 一律聯想「還原雙硫鍵」，這是生化實驗送分題。逐選項分析
A✓ 正確
DTT 為強還原劑，可將雙硫鍵 (-S-S-) 還原成兩個 -SH，使蛋白質次單元解離、展開，便於後續定序（如 Edman degradation）進行。
B✕ 陷阱
破壞氫鍵通常使用 urea（尿素）或 guanidine HCl 等變性劑，而非 DTT。氫鍵維繫二級結構（α-helix、β-sheet），與 DTT 作用機制無關。
C✕
親水性交互作用屬於非共價鍵，通常靠鹽類或極性溶劑調整，DTT 專攻共價的雙硫鍵，不處理此類作用力。
D✕ 陷阱
破壞疏水性交互作用常用 SDS（界面活性劑），會包覆疏水區並使蛋白質帶負電展開。DTT 不具界面活性，無法處理疏水作用。
蛋白質變性試劑對照
| 試劑 | 作用對象 | 鍵結類型 | 應用 |
|---|---|---|---|
| DTT / β-ME / TCEP | 雙硫鍵 -S-S- | 共價鍵 | 還原成 -SH |
| Urea / Gdn-HCl | 氫鍵 | 非共價 | 變性展開 |
| SDS | 疏水作用 | 非共價 | SDS-PAGE 帶負電 |
| 高鹽 / 極端 pH | 離子鍵 | 非共價 | 破壞靜電作用 |
陷阱提醒
出題者常把「DTT」與「SDS」「urea」混在一起考，考生若只記「變性劑」三個字會誤選。關鍵是 DTT 專攻『共價的雙硫鍵』，其他選項都是非共價作用力，必須交給別的試劑。