使用逆相層析法分析bupivacaine（pKa 8.1），動相組成為乙腈／0.1 M Tris（pH 9.0）（8:2），bupivacaine在一分鐘內被沖提出，下列何種作法無法延長bupivacaine的滯留時間？
A降低乙腈的比例
B使用更長的管柱
C將緩衝溶液改為乙酸（pH 5.0）正確答案
D降低流速
答案與詳解
C
正確答案
逆相層析中，弱鹼性藥物在低pH下解離成離子，極性大增，導致滯留時間縮短。
為什麼答案是 C
bupivacaine為弱鹼(pKa 8.1)，在pH 5.0下會大量解離成離子，極性大增，在逆相層析中保留變差，會更快被沖提出來，導致滯留時間縮短，無法達到延長的目的。
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完整詳解
Pro · 無限重點 逆相層析中，弱鹼性藥物在低pH下解離成離子，極性大增，導致滯留時間縮短。
秒殺技巧
弱鹼遇酸解離，極性變大，在逆相層析中跑更快；降有機溶劑、加長管柱、降流速皆能延長滯留時間。逐選項分析
A✕
降低乙腈比例會增加動相極性，減弱沖提力，使分析物與固定相作用時間增加，從而延長滯留時間。
B✕
使用更長管柱會增加分析物在固定相中移動的路徑與理論板數，使滯留時間自然延長。
C✓ 正確
bupivacaine為弱鹼(pKa 8.1)，在pH 5.0下會大量解離成離子，極性大增，在逆相層析中保留變差，會更快被沖提出來，導致滯留時間縮短，無法達到延長的目的。
D✕
降低流速會使動相透過管柱的時間變長，分析物在管柱內停留的時間自然增加，滯留時間延長。
逆相層析(RP-HPLC)延長滯留時間的操作策略
| 操作方式 | 對滯留時間的影響 | 原理說明 |
|---|---|---|
| 降低有機溶劑比例 | 延長 | 動相極性增加，沖提力減弱 |
| 使用更長管柱 | 延長 | 增加分析物在固定相中的路徑 |
| 降低流速 | 延長 | 單位時間內動相移動距離減少 |
| 弱鹼調低pH / 弱酸調高pH | 縮短 | 增加解離度，極性大增，保留變差 |
陷阱提醒
考生易誤以為改變pH只是改變溶解度，而忽略解離狀態對極性的巨大影響。弱鹼在低pH下解離成離子，極性極強，在逆相層析中幾乎不保留，會更快被沖提出來，導致滯留時間縮短而非延長。