專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學107 年第 42 題單選題
以電子顯微鏡檢測病毒前可使用下列何者進行負染色？
Ahematoxylin-eosin
Bacridine orange
Cphosphotungstic acid正確答案
Dtrypan blue
C正確答案
電子顯微鏡負染色技術使用磷鎢酸 (PTA) 等重金屬鹽，使病毒輪廓在暗背景中清晰呈現。
為什麼答案是 C
磷鎢酸 (phosphotungstic acid, PTA) 是重金屬電子緻密物質，無法穿透病毒顆粒，反而堆積在病毒周圍與凹陷處，使背景暗、病毒亮，達成負染色觀察病毒形態。
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完整詳解
Pro · 無限重點 電子顯微鏡負染色技術使用磷鎢酸 (PTA) 等重金屬鹽，使病毒輪廓在暗背景中清晰呈現。
看到「電鏡 + 負染色」直接選重金屬鹽：磷鎢酸 (PTA) 或醋酸鈾 (uranyl acetate) 是兩大經典試劑。
逐選項分析
A✕ 陷阱
蘇木紫-伊紅 (H&E) 是組織病理學最常用的「光學顯微鏡」染色，看細胞核 (藍紫) 與細胞質 (粉紅)，跟電子顯微鏡無關。
B✕
Acridine orange 是螢光染劑，可區分 DNA (綠) 與 RNA (橘紅)，用於螢光顯微鏡而非電鏡負染。
C✓ 正確
磷鎢酸 (phosphotungstic acid, PTA) 是重金屬電子緻密物質，無法穿透病毒顆粒，反而堆積在病毒周圍與凹陷處，使背景暗、病毒亮，達成負染色觀察病毒形態。
D✕ 陷阱
Trypan blue (錐蟲藍) 用於細胞活性測定 (死細胞被染藍、活細胞排除染料)，是光鏡下的活性染色，不用於電鏡。
常見染劑用途對照
| 染劑 | 類別 | 主要用途 | 顯微鏡 |
|---|
| Hematoxylin-Eosin | 組織染色 | 細胞核/質形態 | 光學顯微鏡 |
| Acridine orange | 螢光染劑 | DNA/RNA 區分 | 螢光顯微鏡 |
| Phosphotungstic acid | 重金屬鹽 | 病毒負染色 | 電子顯微鏡 |
| Trypan blue | 排除染劑 | 細胞存活率 | 光學顯微鏡 |
| Uranyl acetate | 重金屬鹽 | 病毒負染/切片 | 電子顯微鏡 |
本題陷阱在於把光鏡常見染劑 (H&E、trypan blue、acridine orange) 混入選項，誘導考生憑「熟悉感」作答。關鍵字是「電子顯微鏡」+「負染色」，必須選重金屬鹽 (electron-dense)，因為電子無法穿透重金屬，才能形成對比。 
