專技高考-醫事檢驗師臨床血清免疫學與臨床病毒學109 年第 52 題單選題
下列何種病毒分生診斷方法利用到RNA polymerase及reverse transcriptase？
Apolymerase chain reaction
Bbranched DNA amplification
Cligase chain reaction
Dtranscription-based amplification正確答案
D正確答案
Transcription-based amplification（如NASBA、TMA）是等溫核酸放大法，同時使用RNA polymerase與reverse transcriptase。
為什麼答案是 D
轉錄式放大法（NASBA / TMA）為等溫反應，先以reverse transcriptase將RNA反轉錄為cDNA，再由RNA polymerase大量轉錄出RNA，循環放大，同時用到兩種酵素，完全符合題意。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Transcription-based amplification（如NASBA、TMA）是等溫核酸放大法，同時使用RNA polymerase與reverse transcriptase。
看到「RNA polymerase + reverse transcriptase」就鎖定轉錄式放大法(TMA/NASBA)，答案D。
逐選項分析
A✕ 陷阱
傳統PCR僅使用DNA polymerase（如Taq polymerase）進行雙股DNA放大，並需溫度循環。雖然RT-PCR會用到reverse transcriptase，但題目選項只寫PCR，且PCR本身不含RNA polymerase，故不符。
B✕
branched DNA (bDNA) 是「訊號放大」而非「標的放大」技術，利用分支探針與訊號分子放大偵測訊號，不需要polymerase或reverse transcriptase，原理完全不同。
C✕
ligase chain reaction (LCR) 利用DNA ligase連接相鄰探針來放大，依賴的是接合酶而非polymerase或reverse transcriptase，與題意不符。
D✓ 正確
轉錄式放大法（NASBA / TMA）為等溫反應，先以reverse transcriptase將RNA反轉錄為cDNA，再由RNA polymerase大量轉錄出RNA，循環放大，同時用到兩種酵素，完全符合題意。
核酸放大技術比較
| 方法 | 關鍵酵素 | 放大類型 | 溫度 |
|---|
| PCR | DNA polymerase | 標的放大 | 溫度循環 |
| bDNA | 無(探針) | 訊號放大 | 等溫 |
| LCR | DNA ligase | 標的放大 | 溫度循環 |
| TMA/NASBA | RT + RNA pol | 標的放大 | 等溫 |
易誤選A，因為RT-PCR也用reverse transcriptase。但PCR的放大核心酵素是DNA polymerase，並無RNA polymerase。只有轉錄式放大法(TMA/NASBA)同時使用RNA polymerase與reverse transcriptase，需精準辨別兩酵素的組合。 
