專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 60 題單選題
下列檢驗病毒核酸的方法,何者會增加病毒核酸的數目?
ANucleic acid sequence-based amplification (NASBA)正確答案
BHybrid capture assay
CBranched DNA assay (bDNA)
DSouthern blot
A正確答案
NASBA 屬於目標核酸增幅技術,會複製 RNA 標的;其餘三者為訊號放大或雜交偵測,核酸數量不變。
為什麼答案是 A
NASBA 是等溫核酸增幅技術,利用 T7 RNA polymerase、reverse transcriptase 與 RNase H 三酶系統,可在 41°C 下大量複製 RNA 標的,核酸數量呈指數增加,常用於 HIV、HCV 等 RNA 病毒檢測。
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完整詳解
Pro · 無限重點 NASBA 屬於目標核酸增幅技術,會複製 RNA 標的;其餘三者為訊號放大或雜交偵測,核酸數量不變。
看到「amplification」就先選!訊號放大 vs 核酸放大要分清楚。
逐選項分析
A✓ 正確
NASBA 是等溫核酸增幅技術,利用 T7 RNA polymerase、reverse transcriptase 與 RNase H 三酶系統,可在 41°C 下大量複製 RNA 標的,核酸數量呈指數增加,常用於 HIV、HCV 等 RNA 病毒檢測。
B✕ 陷阱
Hybrid capture 是「訊號放大」技術,以 RNA 探針與 DNA 標的結合形成 RNA-DNA hybrid,再用抗體偵測,核酸本身數量沒有增加,僅放大訊號。HPV 檢測常用此法。
C✕ 陷阱
bDNA 也是訊號放大技術,透過分支狀的探針結構讓化學發光訊號倍增,標的核酸本身完全不被複製,故核酸數量不變。常用於 HCV、HIV 病毒量測定。
D✕
Southern blot 是傳統 DNA 雜交偵測法,將電泳分離後的 DNA 轉漬到膜上,再用標記探針雜交,僅是偵測既有 DNA,無任何放大核酸數量的步驟。
病毒核酸檢測方法分類
| 方法 | 類型 | 是否放大核酸 | 代表應用 |
|---|
| PCR / NASBA / TMA / LAMP | 目標核酸放大 | ✅ 是 | HIV、HCV、HBV |
| bDNA | 訊號放大 | ❌ 否 | HCV、HIV viral load |
| Hybrid Capture | 訊號放大 | ❌ 否 | HPV、CMV |
| Southern / Northern blot | 雜交偵測 | ❌ 否 | 傳統 DNA/RNA 偵測 |
考生常以為「能偵測到病毒核酸」就等於「放大核酸」,其實 bDNA 與 Hybrid capture 都是把訊號變強,核酸量完全不動。題目問的是「增加核酸數目」,必須選真正在複製核酸的 NASBA。
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