專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)104 年第 77 題單選題
純化DNA後,經適當稀釋後測定260 nm與280 nm的吸光度,下列何種結果顯示此DNA樣品有較多的RNA汙染?
AOD260=0.42;OD280=0.23
BOD260=0.26;OD280=0.23
COD260=0.40;OD280=0.17正確答案
DOD260=0.30;OD280=0.17
C正確答案
DNA 純度 OD260/OD280 約 1.8,比值越高(>2.0)代表 RNA 污染越多。
為什麼答案是 C
0.40/0.17 ≈ 2.35,比值明顯 >2.0,RNA 在 260 nm 吸光較強,比值升高即代表樣品中 RNA 污染量高。
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完整詳解
Pro · 無限重點 DNA 純度 OD260/OD280 約 1.8,比值越高(>2.0)代表 RNA 污染越多。
算 OD260/OD280:A=1.83、B=1.13、C=2.35、D=1.76。比值最高者 RNA 污染最多。
逐選項分析
A✕
0.42/0.23 ≈ 1.83,落在純 DNA 標準範圍(1.8 左右),純度良好,無明顯 RNA 污染。
B✕ 陷阱
0.26/0.23 ≈ 1.13,比值偏低(<1.8),代表蛋白質或酚類污染,而非 RNA 污染,方向相反。
C✓ 正確
0.40/0.17 ≈ 2.35,比值明顯 >2.0,RNA 在 260 nm 吸光較強,比值升高即代表樣品中 RNA 污染量高。
D✕
0.30/0.17 ≈ 1.76,接近 1.8 的純 DNA 標準,純度尚可,無明顯 RNA 污染問題。
OD260/OD280 比值判讀
| 比值 | 判讀 | 可能污染源 | 處理方式 |
|---|
| < 1.8 | DNA 不純 | 蛋白質、酚類 | 重新酚/氯仿萃取 |
| ≈ 1.8 | 純 DNA | 無 | 可直接使用 |
| ≈ 2.0 | 純 RNA | — | RNA 樣品標準 |
| > 2.0 | DNA 含 RNA | RNA 污染 | RNase 處理 |
考生常誤以為「比值低」就是 RNA 污染,其實正好相反。RNA 在 260 nm 吸光更強,故污染時 OD260 升高、比值變大;蛋白質才會讓比值降低。看到 >2.0 想 RNA、<1.8 想蛋白質。
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