專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）104 年第 72 題單選題
下列何種分子檢驗的方法無法用來鑑定人類白血球抗原（HLA）？
A限制片段長度多型性（Restriction fragment length polymorphism; RFLP）正確答案
B序列特異性聚合酶連鎖反應（Sequence-specific primer-polymerase chain reaction; SSP-PCR）正確答案
C單股結構多型性（Single-strand conformation polymorphism; SSCP）正確答案
D增幅阻礙突變系統（Amplification refractory mutation system; ARMS）正確答案
A、B、C、D正確答案
HLA 分型常用 RFLP、SSP-PCR、SSOP；SSCP 是篩檢未知點突變用，無法明確分型 HLA。
為什麼答案是 A、B、C、D
SSCP 是利用單股 DNA 在非變性膠中的構形差異來偵測「未知」點突變，主要用於突變篩檢（如 p53），無法直接鑑定 HLA 高度多型性的等位基因。
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完整詳解
Pro · 無限重點 HLA 分型常用 RFLP、SSP-PCR、SSOP；SSCP 是篩檢未知點突變用，無法明確分型 HLA。
問「HLA 分型」常見方法 → RFLP、SSP、SSOP、SBT、ARMS 都可；SSCP 偵測未知突變不適合。
逐選項分析
A✕
RFLP 利用限制酶切割後片段長度差異，可區分 HLA 等位基因多型性，是早期 HLA 分型的標準方法之一（PCR-RFLP）。
B✕
SSP-PCR 使用序列特異性引子，只有完全配對的 HLA 等位基因才會產生擴增產物，是目前 HLA 分型的主流方法之一。
C✓ 正確
SSCP 是利用單股 DNA 在非變性膠中的構形差異來偵測「未知」點突變，主要用於突變篩檢（如 p53），無法直接鑑定 HLA 高度多型性的等位基因。
D✕ 陷阱
ARMS 與 SSP-PCR 原理相似，皆利用 3' 端特異性引子辨識單一鹼基差異，可用於 HLA 等位基因鑑定，也是常見的 SNP 分型方法。
分子檢驗方法用途對照
| 方法 | 原理 | 主要用途 | 是否適合HLA分型 |
|---|
| RFLP | 限制酶切割片段長度差異 | 已知多型性鑑定 | ✅ 可 |
| SSP-PCR | 序列特異性引子擴增 | 已知等位基因鑑定 | ✅ 主流 |
| SSCP | 單股DNA構形差異 | 未知點突變篩檢 | ❌ 不適合 |
| ARMS | 3'端特異性引子辨識SNP | 單鹼基差異鑑定 | ✅ 可 |
考生易混淆「突變篩檢」與「等位基因分型」。SSCP 雖是分子檢驗工具，但只能告訴你「這段序列可能有變異」，無法精確指出是哪一種 HLA 型別；HLA 分型需要能明確判讀已知等位基因的方法。
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