專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）104 年第 49 題單選題
下列關於應用核酸序列的放大反應（Nucleic acid sequence-based amplification, NASBA）的敘述，何者錯誤？
A一般檢體是RNA
B連續恆溫（Isothermal）的反應
C使用T7 RNA聚合酶（Polymerase）
D需使用DNase處理正確答案
D正確答案
NASBA 是恆溫 RNA 擴增技術，用反轉錄酶＋RNase H＋T7 RNA 聚合酶三酶系統，不需 DNase。
為什麼答案是 D
錯誤敘述（題目要選的答案）。NASBA 使用的是 RNase H（用來分解 RNA-DNA hybrid 中的 RNA 鏈），而非 DNase。DNase 會分解 DNA，反而會破壞反應中產生的 cDNA 中間產物。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 NASBA 是恆溫 RNA 擴增技術，用反轉錄酶＋RNase H＋T7 RNA 聚合酶三酶系統，不需 DNase。
NASBA 三大關鍵酶：反轉錄酶、RNase H、T7 RNA 聚合酶。看到 DNase 直接刪！
逐選項分析
A✕
正確敘述。NASBA 主要針對 RNA 模板（如 mRNA、病毒 RNA、rRNA）進行擴增，這也是它在臨床上常用於 RNA 病毒（如 HIV、HCV）檢測的原因。
B✕
正確敘述。NASBA 全程在 41°C 左右的恆溫下進行，不需熱循環儀，這是它與 PCR 最大的差異，省設備又快速。
C✕
正確敘述。NASBA 三酶系統包含反轉錄酶（AMV-RT）、RNase H、T7 RNA 聚合酶。T7 啟動子序列由 primer 帶入後，由 T7 RNA 聚合酶大量轉錄出 RNA 產物。
D✓ 正確
錯誤敘述（題目要選的答案）。NASBA 使用的是 RNase H（用來分解 RNA-DNA hybrid 中的 RNA 鏈），而非 DNase。DNase 會分解 DNA，反而會破壞反應中產生的 cDNA 中間產物。
NASBA 三酶系統與反應特性
| 項目 | 內容 | 功能 | 備註 |
|---|
| 模板 | RNA | 起始材料 | 病毒 RNA、mRNA |
| 反轉錄酶 (AMV-RT) | 酶 1 | RNA→cDNA | 合成互補 DNA |
| RNase H | 酶 2 | 分解 RNA-DNA hybrid 中的 RNA | 非 DNase |
| T7 RNA 聚合酶 | 酶 3 | 由 T7 啟動子轉錄出大量 RNA | 擴增主力 |
| 反應溫度 | 約 41°C | 恆溫進行 | 不需 thermocycler |
命題者把 RNase H 偷換成 DNase 來陷阱考生。兩者名字很像但功能完全相反：RNase H 分解 RNA-DNA hybrid 中的 RNA，是 NASBA 必備；DNase 分解 DNA，加進去反而破壞反應。考分子檢驗最愛用酶名相似度設陷阱。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學） 相關題目
