專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)115 年第 69 題單選題
病毒基因型與疾病病程或治療策略有關,下列何者最不適合用來做病毒基因型鑑定?
Asequencing
Bnucleic acid sequence-based amplification(NASBA)正確答案
Creverse hybridization
Dhybridization onto high-density microarrays
B正確答案
NASBA 是等溫核酸擴增技術,用於定量/偵測 RNA,無法直接判讀序列差異,最不適合做基因型鑑定。
為什麼答案是 B
NASBA 是等溫條件下針對 RNA 的擴增技術(類似 RT-PCR 的替代方案),主要用於病毒 RNA 定量或偵測存在與否,無法辨別序列差異,故不適合做基因型鑑定。
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完整詳解
Pro · 無限重點 NASBA 是等溫核酸擴增技術,用於定量/偵測 RNA,無法直接判讀序列差異,最不適合做基因型鑑定。
基因型鑑定 = 要讀出『序列差異』。NASBA 只是擴增 RNA 不讀序列,直接刷掉。
逐選項分析
A✕
定序(Sequencing)是基因型鑑定的黃金標準,可直接讀出完整核苷酸序列並比對已知基因型,例如 HCV、HIV 基因型分型最常用。
B✓ 正確
NASBA 是等溫條件下針對 RNA 的擴增技術(類似 RT-PCR 的替代方案),主要用於病毒 RNA 定量或偵測存在與否,無法辨別序列差異,故不適合做基因型鑑定。
C✕ 陷阱
反向雜交(Reverse hybridization,如 INNO-LiPA)將型別特異探針固定於膜條,讓擴增產物去雜交,是臨床 HCV、HPV 基因型鑑定最常用的方法之一。
D✕
高密度微陣列(microarray)可同時雜交上千條探針,能一次判讀多種病毒基因型或亞型,屬於高通量基因型鑑定平台。
病毒分子檢驗方法用途對照
| 方法 | 原理 | 主要用途 | 能否分型 |
|---|
| Sequencing | 讀出鹼基序列 | 基因型鑑定、抗藥突變 | ✅ 最佳 |
| NASBA | 等溫 RNA 擴增 | RNA 偵測/定量 | ❌ 不行 |
| Reverse hybridization | 型別探針雜交 (LiPA) | HCV/HPV 分型 | ✅ 可 |
| Microarray | 高密度探針雜交 | 多重分型、SNP | ✅ 可 |
NASBA 常與 PCR 一起被當成『分子檢驗方法』,考生容易以為它能做分型。但擴增 ≠ 分型,NASBA 的產物仍需搭配定序或雜交才能判別基因型,本身不具分型能力。
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