某實驗室近日擬提供抗癌藥物伴隨式基因檢測，下列何種檢測方法最不適用？ (A) 高解析度熔離分析（high-resolution melting analysis）：拷貝數變異 (B) 數位 PCR（digital PCR）：單一核苷酸突變 (C) 次世代定序（next-generation sequencing）：腫瘤基因突變檢測 (D) 免疫組織化學染色（immunohistochemistry）：基因融合表現

專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）115 年第 77 題單選題考點：HRM≠CNV考點：dPCR→SNV

某實驗室近日擬提供抗癌藥物伴隨式基因檢測，下列何種檢測方法最不適用？

A高解析度熔離分析（high-resolution melting analysis）：拷貝數變異正確答案

B數位 PCR（digital PCR）：單一核苷酸突變

C次世代定序（next-generation sequencing）：腫瘤基因突變檢測

D免疫組織化學染色（immunohistochemistry）：基因融合表現

答案與詳解

正確答案

HRM 擅長偵測序列變異（SNV/小插入缺失），不適合用來分析拷貝數變異 (CNV)。

A高解析度熔離分析（high-resolution melting analysis）：拷貝數變異HRM≠CNV✓ 正確

HRM 靠 PCR 產物熔解溫度差異偵測序列變化（SNV、小 indel），無法定量 DNA 拷貝數。CNV 應用 qPCR、ddPCR、MLPA、aCGH 或 NGS，故最不適用。

B數位 PCR（digital PCR）：單一核苷酸突變dPCR→SNV✕ 錯誤

數位 PCR 將反應分割成數萬個微滴，可絕對定量並偵測極低頻率的單一核苷酸突變（如 EGFR T790M），靈敏度可達 0.01%，非常適合伴隨式診斷。

C次世代定序（next-generation sequencing）：腫瘤基因突變檢測✕ 錯誤

D免疫組織化學染色（immunohistochemistry）：基因融合表現✕ 易錯陷阱

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