專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）115 年第 55 題單選題
關於變性梯度膠體電泳法（denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE），下列敘述何者正確？
A隨著變性劑濃度增加，DNA開始解離形成單股，而增加移動速率
B欲分析之DNA 分子的Tm較低時，其解析力較佳
C欲決定出變性劑的最佳使用濃度範圍，宜使用電泳方向與變性劑梯度垂直的電泳方式正確答案
D電泳操作之溫度需隨變性劑濃度增加而增加
C正確答案
DGGE 利用變性劑梯度使 DNA 部分解離而改變移動速率；決定最佳變性劑濃度需用垂直梯度電泳。
為什麼答案是 C
正確。欲找出最佳變性劑濃度範圍時，採用『垂直型 DGGE』（perpendicular DGGE），電泳方向與變性劑梯度垂直，可一次觀察 DNA 在各濃度下的解離曲線，決定正式實驗的濃度範圍。
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完整詳解
Pro · 無限重點 DGGE 利用變性劑梯度使 DNA 部分解離而改變移動速率；決定最佳變性劑濃度需用垂直梯度電泳。
記口訣：DGGE 解離後『卡住』不是加速；垂直電泳找濃度範圍，平行電泳做正式分析。
逐選項分析
A✕ 陷阱
方向顛倒。DNA 一旦部分解離變成 Y 型分支結構，會『卡』在膠體中，移動速率反而『減慢』而非加快，這正是 DGGE 能分辨序列差異的關鍵。
B✕
Tm 過低的 DNA 會在極低變性劑濃度下就完全解離，反而失去解析力。解析力好的條件是 Tm 適中，讓不同序列在梯度中的特定位置解離出差異。
C✓ 正確
正確。欲找出最佳變性劑濃度範圍時，採用『垂直型 DGGE』（perpendicular DGGE），電泳方向與變性劑梯度垂直，可一次觀察 DNA 在各濃度下的解離曲線，決定正式實驗的濃度範圍。
D✕
DGGE 的操作溫度為『恆溫』（通常 60°C），是靠變性劑濃度梯度達到解離效果，而非靠溫度變化。若溫度隨濃度變動反而無法標準化，那是 TGGE（溫度梯度）的概念。
DGGE vs TGGE 比較
| 項目 | DGGE | TGGE | 共同點 |
|---|
| 變性方式 | 化學變性劑（urea+formamide）梯度 | 溫度梯度 | 使部分解離 |
| 操作溫度 | 恆溫 60°C | 溫度變化 | — |
| 找條件方式 | 垂直梯度電泳 | 垂直溫度梯度 | 先找範圍再正式跑 |
| DNA行為 | 部分解離→移動變慢 | 部分解離→移動變慢 | GC clamp 避免全解離 |
A 選項是最典型陷阱：直覺上 DNA 解離成單股『應該跑更快』，但 DGGE 的原理正好相反——部分解離的分支結構會被膠體『卡住』而減速，這才是能分辨單一鹼基差異的關鍵機制。
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