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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)115 年第 55 題單選題考點:移動速率變慢考點:Tm與解析力

關於變性梯度膠體電泳法(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE),下列敘述何者正確?

A隨著變性劑濃度增加,DNA開始解離形成單股,而增加移動速率
B欲分析之DNA 分子的Tm較低時,其解析力較佳
C欲決定出變性劑的最佳使用濃度範圍,宜使用電泳方向與變性劑梯度垂直的電泳方式正確答案
D電泳操作之溫度需隨變性劑濃度增加而增加
答案與詳解
C
正確答案
DGGE 利用變性劑梯度使 DNA 部分解離而改變移動速率;決定最佳變性劑濃度需用垂直梯度電泳。

逐選項解析

A隨著變性劑濃度增加,DNA開始解離形成單股,而增加移動速率移動速率變慢✕ 易錯陷阱
方向顛倒。DNA 一旦部分解離變成 Y 型分支結構,會『卡』在膠體中,移動速率反而『減慢』而非加快,這正是 DGGE 能分辨序列差異的關鍵。
B欲分析之DNA 分子的Tm較低時,其解析力較佳Tm與解析力✕ 錯誤
Tm 過低的 DNA 會在極低變性劑濃度下就完全解離,反而失去解析力。解析力好的條件是 Tm 適中,讓不同序列在梯度中的特定位置解離出差異。
C欲決定出變性劑的最佳使用濃度範圍,宜使用電泳方向與變性劑梯度垂直的電泳方式✓ 正確
D電泳操作之溫度需隨變性劑濃度增加而增加✕ 錯誤

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