專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)115 年第 73 題單選題
qPCR 技術可應用於染色體易位造成的fusion transcript的絕對定量,如圖實線是連續10 倍稀釋 100~109 copies 的BCR-ABL1 fusion transcript標準品的擴增曲線,虛線則為CML病人檢體進行qPCR後的擴增曲線。此檢體中 BCR-ABL1 fusion transcript的含量為何?
A101~102 copies
B102~103 copies
C105~106 copies
D107~108 copies正確答案
D正確答案
虛線 Ct 落在第 2、3 條標準曲線之間,對應 \(10^7\sim10^8\) copies,故選 D。
為什麼答案是 D
虛線 Ct≈18,落在 \(10^8\) 與 \(10^7\) 標準曲線之間,故為 \(10^7\sim10^8\) copies。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 虛線 Ct 落在第 2、3 條標準曲線之間,對應 \(10^7\sim10^8\) copies,故選 D。
1. qPCR 絕對定量原理:起始模板量越多,越早跨越 threshold(Ct 值越小)。
2. 標準品為 \(10^0\sim10^9\) copies 的 10 倍序列稀釋,共 10 條實線,由左至右依序為 \(10^9, 10^8, 10^7, \dots, 10^0\) copies。
3. 由圖讀取:最左實線 Ct≈12(\(10^9\)),第二條 Ct≈16(\(10^8\)),第三條 Ct≈20(\(10^7\)),每多一條 Ct 約增加 3.3 cycle(\(\log_2 10\approx3.32\))。
4. 虛線 Ct≈18,介於第 2 條(\(10^8\))與第 3 條(\(10^7\))標準曲線之間。
5. 因此病人檢體 BCR-ABL1 fusion transcript 含量為 \(10^7\sim10^8\) copies。
逐選項分析
A✕
\(10^1\sim10^2\) copies 對應 Ct≈37~40,遠晚於虛線。
B✕
\(10^2\sim10^3\) copies 約對應 Ct≈33~37,與虛線位置不符。
C✕
\(10^5\sim10^6\) copies 約對應 Ct≈23~27,比虛線晚 5 個 cycle 以上。
D✓ 正確
虛線 Ct≈18,落在 \(10^8\) 與 \(10^7\) 標準曲線之間,故為 \(10^7\sim10^8\) copies。
qPCR 標準曲線判讀(10 倍稀釋)
| 拷貝數 | 預期 Ct(本圖) |
|---|
| \(10^9\) | ≈12 |
| \(10^8\) | ≈16(最近虛線左側) |
| \(10^7\) | ≈20(最近虛線右側) |
| \(10^6\) | ≈23 |
| \(10^3\) | ≈33 |
| \(10^0\) | ≈40+ |
易誤把最左側曲線當成低拷貝;實際上 Ct 越小代表起始模板越多,須由左至右遞減為 \(10^9 \to 10^0\)。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學) 相關題目