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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)11551單選題

以次世代定序(next-generation sequencing, NGS)技術進行腫瘤基因突變檢測時,擴增過程常造成定序錯誤;下列何種方式可以最有效降低定序錯誤率?

A增加起始DNA 量進行反應
B提高樣本的腫瘤細胞含量
C使用獨立分子索引(unique molecular index, UMI)作為條碼正確答案
D增加文庫建構(library construction)時,聚合酶連鎖反應(PCR)的循環次數
答案與詳解
C
正確答案
UMI 為每個原始 DNA 分子貼上獨特條碼,可辨識並校正 PCR 擴增與定序錯誤,是 NGS 降低錯誤率最有效方法。

為什麼答案是 C

UMI 在文庫建構時為每條原始 DNA 分子貼上獨特分子條碼,定序後可將來自同一分子的 reads 歸為一群(consensus read),區分真實突變與 PCR/定序錯誤,大幅降低偽陽性。

考點:起始量影響靈敏度考點:樣本純度 ≠ 錯誤率考點:UMI 校正錯誤考點:PCR 循環越多錯越多
載入中…

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