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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)11073單選題

在以桑格定序法(Sanger sequencing)進行體細胞基因突變(somatic mutation)分析時,如果待測樣品的異質性(heterogeneity)很高的時候,下列何者需要謹慎評估?

A抽核酸的方法
B定序的引子(primer)設計
C訊號基準線(baseline)的隔斷值(cut-off value)正確答案
D環境的溫濕度
答案與詳解
C
正確答案
Sanger定序偵測體細胞突變時,異質性高代表突變訊號弱,須謹慎設定baseline的cut-off值以免漏判。

為什麼答案是 C

異質性高表示突變型DNA占比低,定序圖譜上突變峰(mutant peak)訊號微弱,容易被當成背景雜訊。此時必須謹慎評估baseline的cut-off值,才能正確區分真實突變與雜訊,避免偽陰性或偽陽性。

考點:核酸前處理考點:引子設計考點:訊號判讀閾值考點:環境條件
載入中…

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