實體腫瘤常處於不穩定的狀態且異質性（heterogeneity）高，探索癌細胞未知的基因突變可以做為未來分子檢驗或藥物治療的標的。下列何種方法最適合檢測癌細胞未知的基因突變？
A肽核酸聚合酶連鎖反應（PNA-PCR）
B即時定量聚合酶連鎖反應（real-time qPCR）
C增幅阻礙突變系統（ARMS）
D次世代定序（next-generation sequencing）正確答案
答案與詳解
逐選項解析
A肽核酸聚合酶連鎖反應（PNA-PCR）PNA-PCR原理✕ 錯誤
PNA-PCR (肽核酸聚合酶連鎖反應) 是利用 PNA 探針結合野生型 DNA 以抑制其擴增，從而富集並檢測微量的突變型 DNA。此方法必須針對「已知」突變設計 PNA 探針，無法探索未知突變。
B即時定量聚合酶連鎖反應（real-time qPCR）qPCR應用✕ 錯誤
即時定量 PCR (real-time qPCR) 利用螢光探針或染劑進行核酸定量或定性分析，必須針對「已知」的標的序列設計專一性引子與探針，無法用於發現新的未知突變。
C增幅阻礙突變系統（ARMS）✕ 易錯陷阱
D次世代定序（next-generation sequencing）✓ 正確
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