專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）113 年第 50 題單選題
利用解離曲線分析法（melting curve analysis）進行單一核苷酸多型性（single nucleotide polymorphism, SNP）的檢測；下圖中的何種曲線是C/T異型合子（heterozygote）樣本的檢驗結果？
A僅A、B曲線
B僅B、C曲線
C僅A、C曲線
DA、B、C曲線正確答案
D正確答案
melting curve分析SNP時，C/T異型合子（heterozygote）含兩種等位基因，會同時產生兩條不同Tm的解離曲線，但實際訊號是兩者疊加的寬峰，正確答案是A、B、C三條曲線均與heterozygote相關。
為什麼答案是 D
圖中A（紅，Tm最高約88-89°C）代表C/C同型合子成分，C（綠，Tm最低約84-85°C）代表T/T同型合子成分，B（黃，Tm居中且曲線較寬）則為兩者疊加的異型合子特徵寬峰。C/T heterozygote樣本同時含兩個等位基因，其解離曲線同時呈現A、B、C三種特徵，因此三條曲線均屬於heterozygote的檢驗結果。
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完整詳解
Pro · 無限重點 melting curve分析SNP時，C/T異型合子（heterozygote）含兩種等位基因，會同時產生兩條不同Tm的解離曲線，但實際訊號是兩者疊加的寬峰，正確答案是A、B、C三條曲線均與heterozygote相關。
heterozygote含C/C與T/T兩種同型合子的混合，其解離曲線為兩者的疊加寬曲線，因此圖中三條曲線（A高Tm、C低Tm、B中間寬峰疊加）都屬於heterozygote檢測結果的組成。
逐選項分析
A✕ 陷阱
僅選A、B曲線忽略了C曲線。heterozygote解離時同時含兩種等位基因片段，A（高Tm，對應C/C同型合子成分）、C（低Tm，對應T/T同型合子成分）以及B（兩者疊加的寬峰中間形態）三者均會出現，只選兩條不完整。
B✕
僅選B、C曲線漏掉了A曲線（高Tm成分）。C/T heterozygote的解離曲線應同時包含高Tm、低Tm及疊加寬峰三種特徵，僅B、C無法完整代表。
C✕ 陷阱
僅選A、C曲線（高Tm與低Tm），忽略了B曲線（兩者疊加形成的寬峰中間曲線）。heterozygote樣本因同時含兩種等位基因，解離訊號會出現疊加的寬曲線如B，不能只看兩端。
D✓ 正確
圖中A（紅，Tm最高約88-89°C）代表C/C同型合子成分，C（綠，Tm最低約84-85°C）代表T/T同型合子成分，B（黃，Tm居中且曲線較寬）則為兩者疊加的異型合子特徵寬峰。C/T heterozygote樣本同時含兩個等位基因，其解離曲線同時呈現A、B、C三種特徵，因此三條曲線均屬於heterozygote的檢驗結果。
Melting Curve Analysis — 各基因型與曲線特徵對照
| 基因型 | 圖中對應曲線 | Tm位置 | 曲線形態特徵 |
|---|
| C/C 同型合子 | A（紅） | 最高，約88-89°C | 陡降，單一窄峰 |
| T/T 同型合子 | C（綠） | 最低，約84-85°C | 陡降，單一窄峰 |
| C/T 異型合子 | B（黃）+ A + C疊加 | 中間寬峰，約86-87°C | 較寬平，為兩峰疊加，涵蓋A/B/C三條曲線特徵 |
考生常誤以為heterozygote只對應一條「中間寬峰」曲線（即B），而忽略heterozygote樣本在解離分析中其訊號是A（高Tm等位基因）與C（低Tm等位基因）兩種成分疊加而成，因此A、B、C三條曲線均可作為C/T異型合子的檢驗呈現。只選B一條是最大陷阱。
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