PCR反應中,primer決定了核酸放大的特異性,在設計primer時的考慮,下列何者最適當?
Aprimer的secondary structure會減少標的PCR產物合成的產量正確答案
B調整primer的長度,可改變primer annealing的溫度,溫度最好限制在40~50℃
Cprimer 本身的5'端和3'端形成互補時,會形成primer dimer
Dprimer 的3'端可加上與模板非互補的序列,增加primer的應用性
答案與詳解
Primer 自身若形成 hairpin 等二級結構,會使 primer 無法有效與模板黏合,競爭消耗有效 primer,導致標的 PCR 產物合成量下降,敘述正確且為設計時應避免的考量。
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