設計PCR條件時，引子（primer）黏合到DNA 模板（annealing）的溫度需要被優化。下列何者與決定annealing反應之最適溫度最無關？
APCR緩衝液之鹽類濃度
B引子的GC content
CPCR產物的片段長度正確答案
D引子有mismatches的序列
答案與詳解
為什麼答案是 C
PCR產物（amplicon）片段長度影響的是延伸（extension）步驟所需時間，而非annealing溫度。annealing溫度取決於引子本身性質，故與最適黏合溫度「最無關」，為正解。
考點：鹽類影響Tm考點：GC content決定Tm考點：片段長度影響延伸考點：mismatch降低配對
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