專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)113 年第 56 題單選題
下列何者最不適用於分析增幅阻礙突變系統(amplification refractory mutation system, ARMS)的產物?
Aagarose gel electrophoresis(AGE)
Bcapillary electrophoresis(CE)
Cpolyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)
Dpulse-field gel electrophoresis(PFGE)正確答案
D正確答案
ARMS產物是小片段PCR DNA(數十至數百bp),PFGE專門分離超大DNA(數十kb至Mb),尺度完全不對,最不適用。
為什麼答案是 D
脈衝電場凝膠電泳專為分離超大DNA(數十kb至Mb,如完整染色體)設計,主要用於細菌分型。ARMS產物僅數十至數百bp太小,PFGE既分不開也無必要,最不適用,為正解。
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完整詳解
Pro · 無限重點 ARMS產物是小片段PCR DNA(數十至數百bp),PFGE專門分離超大DNA(數十kb至Mb),尺度完全不對,最不適用。
看片段大小!ARMS=小PCR產物;PFGE=分離超大染色體片段,殺雞用牛刀且根本分不開小片段。
逐選項分析
A✕
瓊脂糖凝膠電泳是分析PCR產物最常規的方法,能輕鬆分離數百bp至數kb的DNA片段,完全適用於ARMS產物判讀,故非答案。
B✕
毛細管電泳解析度高,可精確分辨僅差幾個鹼基的小片段,常用於螢光標記PCR與基因型分析,非常適合ARMS產物,故非答案。
C✕
聚丙烯醯胺凝膠電泳對小片段DNA解析度極佳,可分辨單一鹼基差異,適合分析ARMS這類短PCR產物,故非答案。
D✓ 正確
脈衝電場凝膠電泳專為分離超大DNA(數十kb至Mb,如完整染色體)設計,主要用於細菌分型。ARMS產物僅數十至數百bp太小,PFGE既分不開也無必要,最不適用,為正解。
各電泳方法適用DNA大小
| 方法 | 適用片段大小 | 解析度 | 典型用途 |
|---|
| AGE | 100 bp ~ 數十 kb | 中 | 一般PCR產物 |
| PAGE | 數 bp ~ 1 kb | 高(可辨單鹼基) | 小片段、定序 |
| CE | 數 bp ~ 數百 bp | 極高 | 螢光基因型分析 |
| PFGE | 數十 kb ~ Mb | 超大片段 | 細菌分型、染色體 |
考生易被「都是凝膠電泳」混淆而誤以為皆可用。關鍵在DNA片段大小尺度:PFGE是為分離超大DNA(細菌染色體分型)設計,對ARMS的小PCR產物完全不適用,尺度差距達千倍以上。
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