專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)112 年第 54 題單選題
下列何種方法不是擴增核酸而是擴增反應訊號以增加檢測靈敏度?
A聚合酶連鎖反應(PCR)
B突變分辨聚合酶連鎖反應(mutagenically separated polymerase chain reaction, MS-PCR)
C分枝DNA(branched DNA, bDNA)技術正確答案
D應用核酸序列的放大反應(nucleic acid sequence-based amplification, NASBA)
C正確答案
bDNA(分枝DNA)技術是擴增「訊號」而非核酸本身,靠多分支探針放大訊號來提升靈敏度。
為什麼答案是 C
bDNA 技術不複製目標核酸,而是利用分枝狀探針層層雜交,結合大量標記酵素或探針放大「偵測訊號」,藉此提升靈敏度,正是本題要選的訊號擴增法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 bDNA(分枝DNA)技術是擴增「訊號」而非核酸本身,靠多分支探針放大訊號來提升靈敏度。
看到「擴增訊號 ≠ 擴增核酸」就鎖定 bDNA,它不複製目標核酸而是放大偵測訊號。
逐選項分析
A✕
PCR 是經典的核酸(DNA)擴增技術,透過變性、黏合、延伸循環使目標序列指數增加,屬於「擴增核酸」而非訊號,故非本題答案。
B✕ 陷阱
MS-PCR 是 PCR 的變化型,用於分辨點突變,本質仍是擴增目標核酸序列,只是引子設計能區別野生型與突變型,故屬核酸擴增。
C✓ 正確
bDNA 技術不複製目標核酸,而是利用分枝狀探針層層雜交,結合大量標記酵素或探針放大「偵測訊號」,藉此提升靈敏度,正是本題要選的訊號擴增法。
D✕
NASBA 是以 RNA 為模板的等溫核酸擴增技術,運用反轉錄酶、RNase H 與 T7 RNA 聚合酶大量合成 RNA 產物,仍屬擴增核酸而非訊號。
分子檢驗放大策略比較
| 方法 | 放大對象 | 原理 | 類別 |
|---|
| PCR | 核酸 | 熱循環指數擴增 DNA | 目標擴增 |
| MS-PCR | 核酸 | 區別突變的 PCR | 目標擴增 |
| NASBA | 核酸(RNA) | 等溫酵素擴增 RNA | 目標擴增 |
| bDNA | 訊號 | 分枝探針層層雜交放大訊號 | 訊號擴增 |
本題為反向題,問「不是擴增核酸」者。考生若只記得幾種擴增技術名稱,容易誤把 NASBA 或 MS-PCR 當答案。關鍵在區分『目標擴增』與『訊號擴增』,bDNA 是唯一不複製核酸而放大訊號的方法。
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