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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)11246單選題

關於Sanger sequencing的敘述,下列何者最不適當?

A原理是雙去氧核苷酸鏈中止法(dideoxynucleotide chain termination)
B所使用的核苷酸包括雙去氧核苷酸與去氧核苷酸
C可以用四種螢光分別標定不同的雙去氧核苷酸
D定序引子應設計在變異點前5 bp左右,以利判讀正確答案
答案與詳解
D
正確答案
Sanger定序為金標準定序法,定序引子須距變異點50~100 bp以上,太近(5 bp)會因起始訊號雜亂而無法判讀。

為什麼答案是 D

此為最不適當者。定序起始數十bp訊號常不穩定(峰形雜亂),引子若僅設在變異點前5 bp,變異處落在不可靠區。正確應設計距變異點約50~100 bp以上,確保判讀清晰。

考點:鏈終止法原理考點:dNTP與ddNTP併用考點:四色螢光標記考點:引子設計距離
載入中…

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