關於Sanger sequencing的敘述,下列何者最不適當?
A原理是雙去氧核苷酸鏈中止法(dideoxynucleotide chain termination)
B所使用的核苷酸包括雙去氧核苷酸與去氧核苷酸
C可以用四種螢光分別標定不同的雙去氧核苷酸
D定序引子應設計在變異點前5 bp左右,以利判讀正確答案
答案與詳解
此為最不適當者。定序起始數十bp訊號常不穩定(峰形雜亂),引子若僅設在變異點前5 bp,變異處落在不可靠區。正確應設計距變異點約50~100 bp以上,確保判讀清晰。
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