專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)112 年第 55 題單選題考點:高敏感性考點:高特異性
下列何者不是nested PCR方法的優點?
A敏感性(sensitivity)高
B特異性(specificity)高
CPCR反應模板(template)所需量較低
DPCR反應Taq DNA polymerase 所需量較低正確答案
D正確答案
Nested PCR用兩對引子做兩輪擴增,優點是高敏感性、高特異性、模板需求低,但因做兩輪反應,反而需要更多Taq酶。
逐選項解析
A敏感性(sensitivity)高高敏感性✕ 錯誤
第一輪先擴增外側片段,第二輪再用內側引子擴增,等於把目標DNA放大兩次,訊號倍增,因此敏感性極高,可偵測極微量病原核酸。這是nested PCR最大優點。
B特異性(specificity)高高特異性✕ 錯誤
第二輪使用內側引子,必須同時辨識第一輪產物上的兩個正確序列,等於雙重確認,大幅減少非專一性產物(如primer dimer或錯配),故特異性高。
CPCR反應模板(template)所需量較低✕ 錯誤
DPCR反應Taq DNA polymerase 所需量較低✓ 正確
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